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鼠抗人肥大細(xì)胞類(lèi)單克隆抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
SW626(人卵巢癌細(xì)胞)
T-24(人膀胱癌細(xì)胞)
T-47D(人乳腺管癌細(xì)胞)
T84(人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞)
Tca-8113(人舌鱗癌細(xì)胞)
TE-1(人食管癌細(xì)胞)
TF-1(人血液白血病細(xì)胞)
THP-1(人髓系白血病單核細(xì)胞)
TM3(小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞)
TSCCa(人舌鱗癌細(xì)胞)
U-2 OS(人骨肉瘤細(xì)胞)
U251(人膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
U-87 MG(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
U-937(人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)
V79(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)
VCaP(人前列腺癌細(xì)胞)
Vero(非洲綠猴腎細(xì)胞)
WI-38(人胚肺細(xì)胞)
WISH(人羊膜細(xì)胞)
Y1(Y-1) (小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞)
YAC-1(小鼠淋巴瘤細(xì)胞)
ZR-75-1(人乳腺癌細(xì)胞)
ZR-75-30(人乳腺癌細(xì)胞)