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文多靈含量測試盒測定步驟:
1.加樣
1.除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
ARMCX3ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體
ARMCX1ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體
ARMCX2ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX2抗體
Apg10自噬相關(guān)蛋白10抗體
Aminoacylase 1氨基?;?抗體
Adipose Triglyceride Lipase脂肪甘油三酯脂酶抗體
phospho-AMPK alpha-1 (Thr172)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
Amphiregulin雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細胞源性生長因子)抗體
phospho-AQP2(Ser264)磷酸化水通道蛋白2抗體
AXL粘附相關(guān)激酶抗體
phospho-AXL (Tyr698+Tyr702+Tyr703)磷酸化粘附相關(guān)激酶抗體
phospho-AKT1 + AKT2 + AKT3 (Thr308+Thr309+Thr305)磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-AQP2(Ser269)磷酸化水通道蛋白2抗體
phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743)磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
phospho-AKT1(Ser129)磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-Amyloid Precursor Protein (Ser198)磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
phospho-ATF4 (Ser245)磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體
phospho-Androgen Receptor (Ser213)磷酸化雄激素受體抗體