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魚類Elisa試劑盒常用的檢查方法及它的采集保存妙招
點擊次數(shù):918 更新時間:2016-11-21

魚類Elisa試劑盒常用的檢查方法及它的采集保存妙招

 

*、魚類ELISA試劑盒的常用的檢查方法

良好的ELISA板應(yīng)該是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間、同一板各孔之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別,各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大,因此,每一批號的ELISA板在使用前須事先檢查其性能。

常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG包被ELISA板各孔,洗滌后每孔內(nèi)加入適當稀釋度的酶標抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應(yīng)后,分別測每孔溶液的吸光度??刂品磻?yīng)條件,使各孔讀數(shù)在吸光度0.8左右。計算全部讀數(shù)的平均值。所有單個讀數(shù)與全部讀數(shù)的均數(shù)之差,應(yīng)小于10%。

第二、魚類ELISA試劑盒標本的采集及保存:

1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注:以上標本置4℃保存應(yīng)小于1周,-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存,-20℃不應(yīng)超過1個月,-80℃不應(yīng)超過2個月;標本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

第三、魚類ELISA試劑盒的嚴格要求

在魚類白介素1βELISA試劑盒 中一般有二次抗原抗體反應(yīng),即加標本后和加結(jié)合物后,此時反應(yīng)的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定的要求,保溫容器是水浴箱,可使溫度迅速平衡。各ELISA板不應(yīng)疊在一起。為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。濕盒應(yīng)該是金屬的,傳熱容易。如用保溫箱,空濕盒應(yīng)預(yù)先放在其中,以平衡溫度,這在室溫較低時更為重要。加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應(yīng)。

第四、魚類ELISA試劑盒特異性

 

魚類甲狀腺素(T4)ELISA試荊盒用于檢測待測物質(zhì),經(jīng)檢測與其它相儀物質(zhì)無明顯交叉反應(yīng).由于受到技術(shù)及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關(guān)或相儀物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測,因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng).

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