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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì),只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí),實(shí)驗(yàn)表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1~2小時(shí),產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng),可提高反應(yīng)的溫度,有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行,但不宜采用更高的溫度??乖贵w反應(yīng)4℃更為*,在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中過(guò)夜,以形成zui多的沉淀。但因所需時(shí)間太長(zhǎng),在ELISA中一般不予采用。
1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)洗滌時(shí)各孔均需加滿(mǎn)液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
2)用于檢測(cè)的樣品應(yīng)保持新鮮。
3)用戶(hù)在初次使用試劑盒時(shí),應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
4)每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
5)要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性,可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時(shí),lmL的水可以看作是lg、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行確定。
6)在使用微量加樣器時(shí),吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
7)吸取液體時(shí)速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準(zhǔn)確。
8).將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。吸入液體時(shí)的的方法是吸兩檔打一檔,防止由于槍頭的毛細(xì)作用使得部分液體不能流出而造成的誤差。
9)吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
10)抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標(biāo)板只要取出所需量。
55557-30-7 Levopropoxyphene Napsylate 萘磺酸左丙氧芬標(biāo)準(zhǔn)品 300mg
83915-83-7 Lisinopril 賴(lài)諾普利標(biāo)準(zhǔn)品 300mg
554-13-2 Lithium Carbonate 標(biāo)準(zhǔn)品 300mg
110-16-7 Maleic Acid 馬來(lái)酸標(biāo)準(zhǔn)品 300mg
591-27-5 m-Aminophenol 間氨基標(biāo)準(zhǔn)品 300mg
3458-28-4 Mannose 甘露糖標(biāo)準(zhǔn)品 300mg
73816-42-9 Meclocycline Sulfosalicylate 磺基水楊酸氯甲烯標(biāo)準(zhǔn)品 300mg
119478-56-7 Meropenem 標(biāo)準(zhǔn)品 300mg
110-42-9 Methyl Caprate 癸酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品 300mg
106-70-7 Methyl Caproate 己酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品 300mg
111-11-5 Methyl Caprylate 辛酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品 300mg
抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒
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