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產(chǎn)品名稱:鼻疽假單胞菌LAMP試劑盒

產(chǎn)品特點:鼻疽假單胞菌LAMP試劑盒上海一研生物相關(guān)產(chǎn)品:炔草Oxalic acid:349.74 C17H13ClFNO4:105512-06-9

4,7-雙(5-溴-2-噻吩)-2,1,3-并噻二唑:458.24,7- bis (5-) -2,1,3- (-2-):288071-87-4 C14H6Br2N2S3

2-氟-5-甲:236.032- fluoride -5-:4

產(chǎn)品型號:50次

更新日期:2021-02-26

訪問次數(shù):391

50次鼻疽假單胞菌LAMP試劑盒的詳細資料:

儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

參數(shù)規(guī)格:

產(chǎn)品名稱

鼻疽假單胞菌LAMP試劑盒

英文名稱

 Lamp kit for Pseudomonas mallei

規(guī)格

50次

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使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。 
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

甲叔戊Methyl tert amyl ether:102.17 C6H14O:994-05-8

Hoechst33342Hoechst33342:615.99 C27H28N6O·3HCl·3H2:491-52-3

3,5-二氟三氟:182.093,5- two f three f:401-85-4 C7H3F5

2--5-氯三氟甲:195.572- amino -5- three f:445-03-4 C7H5ClF3N

己唑F, f:314.21 C14H17Cl2N3O:79983-71-4

炔草Oxalic acid:349.74 C17H13ClFNO4:105512-06-9

4,7-雙(5-溴-2-噻吩)-2,1,3-并噻二唑:458.24,7- bis (5-) -2,1,3- (-2-):288071-87-4 C14H6Br2N2S3

2-氟-5-甲:236.032- fluoride -5-:452-68-6 C7H6FI

丙溴吡:202.09Pyridine bromide:873-71-2 C8H12BrN

鼻疽假單胞菌LAMP試劑盒重組人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白

TMPRSS7 基因全長ORF克隆

M-CSFR 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ITGA1 基因全長ORF克隆

食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

Tie1 基因全長ORF克隆

CLDN7 基因全長ORF克隆

FGF9 基因全長ORF克隆

GOT2 基因全長ORF克隆

ADAMTS5 基因全長ORF克隆

LEPREL1 基因全長ORF克隆

小鼠 EphA6 / EHK-2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

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