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本公司代理ATCC細胞，提供小鼠黑色素瘤細胞；B16-F0保存售前售后一條龍服務(wù)，若要獲取詳細的說明書或價格信息，點擊了解更多小鼠源細胞。
細胞名稱  小鼠黑色素瘤細胞；B16-F0保存
形態(tài)特性 上皮細胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 B16-Fo是一株小鼠黑絲素瘤細胞系。它可在體外常規(guī)傳代培養(yǎng)，產(chǎn)生高濃度的黑色素?？捎糜诜肿由飳W(xué)中黑色素基因的表達研究。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C24

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

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小鼠黑色素瘤細胞；B16-F0保存在運輸?shù)倪^程中，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，因此客戶在收到貨以后的*時間是要先觀察產(chǎn)品的狀況，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時，請不要立即打開培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱過夜，并于次日在顯微鏡下觀察，此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細胞仍不能貼壁，請試著用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理；如若證實細胞無活力，請在收到貨后48小時內(nèi)將細胞狀態(tài)反饋給我公司，我們將盡快幫助解決。
細胞培養(yǎng)步驟：
一．小鼠黑色素瘤細胞；B16-F0保存培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
注意事項：
1.收到小鼠黑色素瘤細胞；B16-F0保存后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài)，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué)級N-Stearoyldihydro-D-erythro-SphingosineN-十八烷酰二氫-D-赤-鞘氨醇

質(zhì)量規(guī)格：BR,UV>30%N-tert-Butyl-α-phenylnitroneN-叔丁基-α-苯基硝酮(>98.0%(HPLC)(T))

質(zhì)量規(guī)格：BRBOC-L-MethionineN-叔丁氧羰基-L-

質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBoc-Asn-(Xan)-OHN-叔丁氧羰基-N'-氧蒽基-L-天

質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué)級Boc-O-(2-bromo-Cbz)-L-TyrosineN-叔丁氧羰基-O-(2-溴芐氧羰基)-L-

質(zhì)量規(guī)格：38000~42000mpa.sN6-Cbz-L-LysineN-碳芐氧基賴氨酸,N6-Cbz-L-賴氨酸

質(zhì)量規(guī)格：>99%，BRFmoc-Lys(Z)-OHN'-芴甲氧羰基-N-芐氧羰基-L-賴氨酸

質(zhì)量規(guī)格：>99%，5NN'-Nitro-D-arginineN'-硝基-D-

pKD1pRC250g

pKH3pRC/CMV250g

pKJE7PrecipitatedTMBChromogenicKit250g

pKK223-3批次1PrehybridizationSolutionsinSSC250g

pKK232-8PrehybridizationSolutionsinSSPE250g

pKK233-3PremixedAcr-BisPowder250g

pKLAC1PremixedAcr-BisPowder250g

pLacZPremixedBCIP/NBTSolution250g

pLAMBLA1305.2PreScissiomProtease250g

pLAPSNPrestainedProteinMarker250g

pLEGFP-C1PrestainedProteinMarker250g

pLEGFP-N1pRetro-Off250g

pAdTrackpRetro-On250g

pLEGFP-N2pRetro-on-EGFP250g

pLentG-KOSMpRetro-on-RFP250g
小鼠黑色素瘤細胞；B16-F0保存Caspase 2  半胱胺酸蛋白酶-2多克隆抗體     0.1ml

Caspase 4  半胱胺酸蛋白酶蛋白-4多克隆抗體     0.1ml

Caspase 4/Caspase 11  半胱胺酸蛋白酶4/11多克隆抗體     0.2ml

Caspase 5  半胱胺酸蛋白酶蛋白5多克隆抗體     0.1ml

Caspase 8  半蛋白酶8多克隆抗體     0.1ml

Caspase-1(actived P10)  天冬氨酸-特異性蛋白酶家族多克隆抗體     0.1ml

Caspase-10  半胱胺酸蛋白酶-10多克隆抗體     0.1ml

Caspase-12  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12多克隆抗體     0.1ml

Caspase-12  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12多克隆抗體     0.1ml

Caspase-13/4  半胱胺酸蛋白酶蛋白-13多克隆抗體     0.2ml

caspase-3 p11  半胱天冬酶-3酶原多克隆抗體     0.1ml

caspase-3 p12 subunit  活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3多克隆抗體     0.1ml