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小鼠雜交瘤細(xì)胞；EphA2品牌在運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，因此客戶在收到貨以后的*時(shí)間是要先觀察產(chǎn)品的狀況，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要立即打開(kāi)培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱過(guò)夜，并于次日在顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)?jiān)囍门_(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理；如若證實(shí)細(xì)胞無(wú)活力，請(qǐng)?jiān)谑盏截浐?8小時(shí)內(nèi)將細(xì)胞狀態(tài)反饋給我公司，我們將盡快幫助解決。

細(xì)胞名稱  小鼠雜交瘤細(xì)胞；EphA2品牌
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)

特征特性 細(xì)胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗，可用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C10

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．小鼠雜交瘤細(xì)胞；EphA2品牌培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng)：
1.收到小鼠雜交瘤細(xì)胞；EphA2品牌后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
本公司代理ATCC細(xì)胞，提供小鼠雜交瘤細(xì)胞；EphA2品牌售前售后一條龍服務(wù)，若要獲取詳細(xì)的說(shuō)明書(shū)或價(jià)格信息，點(diǎn)擊了解更多小鼠源細(xì)胞。
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質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品PyromelliticAcid苯均四酸(>98.0%(T))

質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)Diphenylsulfide苯硫醚(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC）)

質(zhì)量規(guī)格：standardforGC,≥99.5%(GC)BenzilZoneRefined(numberofpasses:22)苯偶酰(區(qū)域精制法精制,熔段數(shù):22)

質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%Benzil苯偶酰(>99.0%(GC))

質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%1H-Benzotriazole苯駢三氮唑（BTA,1,2,3-苯駢三氮唑)

質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Mefenacet苯噻草胺（標(biāo)準(zhǔn)品）

質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Pizotifen苯噻啶

質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=5%Pizotifen苯噻啶（標(biāo)準(zhǔn)品）

SodiumChlorideSolution（化鈉溶液），1M50T

SodiumChlorideSolution（化鈉溶液），5M50T

SodiumCitrateBuffer（檸檬酸鈉緩沖液），0.5M,pH5.050T

SodiumCitrateBuffer（檸檬酸鈉緩沖液），0.5M,pH5.550T

SodiumCitrateBuffer（檸檬酸鈉緩沖液），0.5M,pH6.050T

SodiumCitrateBuffer（檸檬酸鈉緩沖液），0.5M,pH6.550T

SodiumFluorideSolution（氟化鈉溶液），200mM50T

SodiumHydroxideSolution（氧化鈉溶液），10N50T

SodiumHydroxideSolution（氧化鈉溶液），1N50T

SodiumOrthovanadateSolution（正釩酸鈉溶液），100mM50T

SodiumPhosphateBuffer（磷酸鈉緩沖液）,0.2M,pH7.050T

SodiumPhosphateBuffer（磷酸鈉緩沖液）,0.2M,pH7.250T

SodiumPhosphateBuffer（磷酸鈉緩沖液）,0.2M,pH7.550T

SodiumPhosphateBuffer（磷酸鈉緩沖液）,0.2M,pH7.650T

SodiumPhosphateBuffer（磷酸鈉緩沖液）,0.2M,pH8.050T
小鼠雜交瘤細(xì)胞；EphA2品牌DDRGK1  DDRGK1蛋白多克隆抗體     0.2ml

DDX19B/DBP5  解旋酶DEAD5多克隆抗體     0.1ml

DDX4/MVH  DDX4多克隆抗體     0.1ml

DDX43/CT13  腫瘤/抗原13多克隆抗體     0.2ml

DDX53/CT26  腫瘤/抗原26多克隆抗體     0.2ml

DDX58  DDX58多克隆抗體     0.2ml

DEAF1/Deformed Epidermal Autoregulatory Factor 1  畸形表皮自調(diào)節(jié)因子1多克隆抗體     0.2ml

DEC-205/CD205/Ly75  淋巴細(xì)胞抗原75多克隆抗體     0.2ml

DECR1  線粒體2,4-雙烯酰還原酶1多克隆抗體     0.1ml

DECTIN 2  C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族6成員A多克隆抗體     0.1ml

DECTIN-1/CLECSF12/beta Glucan Receptor  β葡聚糖受體多克隆抗體     0.1ml

DEDD1  死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白1多克隆抗體     0.2ml