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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Cell Invasion Assay Kit (24 well,8μM)

產(chǎn)品中文名稱：細(xì)胞侵襲分析試劑盒（24孔板，8μM）

規(guī)格：12 T/12 T×4

貨號：EY-01X8549
用途：僅供科研研究實驗

特點&優(yōu)勢:

•  操作方便快捷。

•  簡單，優(yōu)化的實驗方法。

•  檢測細(xì)胞的侵襲能力。

保存建議:請參閱說明書中各個組件的存儲條件，自發(fā)貨之日起，按照推薦的保存條件，有效期少6個月。

運輸條件:干冰運輸或冰袋運輸（藍(lán)冰）

背景

細(xì)胞的侵襲性，是指細(xì)胞受到外來信號的刺激，由一個地方侵襲到了另一個地方的特性，通常發(fā)生在比如傷口愈合，細(xì)胞分化，胚 胎發(fā)育和腫瘤轉(zhuǎn)移的過程中。

本產(chǎn)品具有下列特點:

 1.操作簡便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的產(chǎn)品：

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.5mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素(18-39)(抗原)

IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

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豚鼠黃體激素(LH)檢測試劑盒 ，英文名： LH ELISA Kit

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MonkeyIerleukin6,IL-6ELISAKit 猴白介素6(IL-6)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforbFGF-6ELISAKit大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子6

細(xì)菌乳糖酵解酚紅瓊脂平板50個

RabbitIerleukin2,IL-2ELISAKit兔子白介素2(IL-2)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

人組酸豐富糖蛋白(HRG)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human HRG (Histidine Rich Glycoprotein) ELISA Kit

人乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit

人膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human ANXA5 (Annexin A5) ELISA Kit

人HA絲酸肽酶1(HA1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human H動?動

小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA 試劑盒

Human vitamin D (VD) ELISA Kit 人(VD)檢測試劑盒

Humanai-spermaibody,AsAbELISAKit 人抗抗體(AsAb)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanChlamydiaachomatis,CT檢測試劑盒人沙眼衣原體(CT)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因玉米T25品系試劑盒20次

Humansecretoryleukocyteproteaseinhibitor,SLPIELISAKit人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子(SLPI)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

細(xì)胞侵襲分析試劑盒（24孔板，8μM）WIF1重組小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 Protein

催乳素(PRL)重組蛋白 Recombinant Prolactin (PRL)

BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein

IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

NT5E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白