產品名稱:末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)
產品特點:末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)的相關產品:EBNA-3 (Epstein barr nuclear antigens 3 0.5mgEBNA-3 (Epstein barr nuclear antigens 3) EB病毒編碼核蛋白-3FTH1 Protein Human 重組人 FTH1 蛋白DSC2重組大鼠 DSC2 / Desmocollin-2 蛋白 Protein
產品型號:
更新日期:2024-11-19
訪問次數:96
末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)的詳細資料:
產品僅供研究使用,不適用于人類或臨床診斷
商品屬性:
產品英文名稱:Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (TdT)
產品中文名稱:末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)
規(guī)格:40 μg/100 μg
貨號:EY-01X8582
用途:僅供科研研究實驗
特點&優(yōu)勢:
序列:氨基酸序列來源于:牛TdT(P06526)(Mer1-Ala509)的氨基酸序列。
蛋白長度:重組牛TdT由509個氨基酸組成,在還原條件下的SDS-PAGE中,它的條帶與理論分子:量一致,為58.3 kDa。
純度:> 90 % ,使用SDS-PAGE檢測
產品形式:蛋白復溶液,復溶液為無菌水溶液50 mM K2HPO4, 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1% Tween20, 1% BSA, 50% Glycerol, pH 6.5.
基因ID:9913
存儲緩沖液無菌水溶液5動?動
背景
,也稱為末端轉移酶,是在未成熟的,B淋巴樣細胞前提,T淋巴細胞前體和急性淋巴細胞白血病/淋巴瘤細胞中表達的一種特殊的DNA聚合酶。 通常,TdT催化將核苷酸添加到DNA分子的3'末端。 與大多數DNA聚合酶不同,它不需要模板。 該酶的優(yōu)選底物是3'突出端,但它也可以將核苷酸添加到平末端或凹入的3'末端。
本產品具有下列特點:
1.操作簡便、快捷??芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。
2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產物。
4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。
操作步驟:
(一)獲得目的基因
1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質粒為模板,按基因序列設計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。
2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉錄形成cDNA第一鏈,以逆轉錄產物為模板進行PCR循環(huán)獲得產物。
(二)構建重組表達載體
1、載體酶切:將表達質粒用限制性內切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。
2、PCR產物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。
(三) 獲得含重組表達質粒的表達菌種
1、 將連接產物轉化大腸桿菌DH5α,根據重組載體的標志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質粒,雙酶切初步鑒定。
2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應篩選更多克隆,重復亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。
3、 以此重組質粒DNA轉化表達宿主菌的感受態(tài)細胞。
(四)誘導表達
1、挑取含重組質粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。
2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。
3、取部分液體作為未誘導的對照組,余下的加入IPTG誘導劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。
4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。
5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。
公司正在出售的產品:
Amylin 糖尿病相關肽(胰島淀粉樣肽 0.5mgAmylin 糖尿病相關肽(胰島淀粉樣肽)
CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白
KIT重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白 Protein
IL1RN Protein Rat 重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽)
IL36G重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169) Protein
小鼠氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)檢測試劑盒 96T/48T
Eighth factors in rats with associated aigen (F VIII Ag) ELISA Kit 大鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)檢測試劑盒
Humanargininevasopressin,AVPELISAKit 人精加壓素(AVP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor1,5-AG(Human1,5-anhydroglucitol)ELISAKit人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨
飲料三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
MouseLactateDehydrogenase,LDHELISAKit小鼠乳酸脫氫酶(LDH)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠轉化生長因子α(TGF-α)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)檢測試劑盒 ,英文名: FⅧAg ELISA Kit
Porcine hyaluronic acid (HA) ELISA Kit 豬透明質酸(HA)檢測試劑盒
馬鈴薯特定基因序列(PATA)核酸檢測試劑盒 48T
CLIAKitforLSP(Humanliverspecificlipoprotein)ELISAKit人抗肝特異性脂蛋白抗體
通用AP酶聯檢測封閉溶液100毫升
ELISAKitIgY雞卵黃免疫球蛋白
末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)KIT重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白 Protein
Amylin 糖尿病相關肽(胰島淀粉樣肽 0.5mgAmylin 糖尿病相關肽(胰島淀粉樣肽)
IL36G重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169) Protein
CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白
IL1RN Protein Rat 重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽)
如果你對末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)感興趣,想了解更詳細的產品信息,填寫下表直接與廠家聯系: |