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產(chǎn)品名稱:重組大鼠腫瘤壞死因子-α(TNF-α)
產(chǎn)品特點(diǎn):重組大鼠腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的相關(guān)產(chǎn)品:ets1/E26 (E-twenty six 1 0.5mgets1/E26 (E-twenty six 1) Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗原CHEK1 Protein Human 重組人 CHK1 / CHEK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)FIGF重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-11-19
訪問(wèn)次數(shù):78
重組大鼠腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的詳細(xì)資料:
產(chǎn)品僅供研究使用,不適用于人類或臨床診斷
商品屬性:
產(chǎn)品英文名稱:Rat TNF-α protein
產(chǎn)品中文名稱:重組大鼠腫瘤壞死因子-α(TNF-α)
規(guī)格:5 μg/20 μg/100 μg/1 mg
貨號(hào):EY-01X8637
用途:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):
標(biāo)簽:無(wú)標(biāo)簽
表達(dá)宿主:大腸桿菌
種屬:大鼠
序列:氨基酸序列來(lái)源于: 鼠源 TNF-α (P16599) (Leu80-Leu235) 表達(dá)的蛋白片段。
活性:使用L929小鼠纖維肉瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞毒性試驗(yàn)。這種效應(yīng)的ED50為100 pg/mL。
蛋白長(zhǎng)度:重組大鼠TNF-α由156個(gè)氨基酸組成,預(yù)測(cè)分子量為 17.2 KD。
純度:> 98 % ,使用SDS-PAGE檢測(cè)
采用 LAL 法檢測(cè),每 1 μg 蛋白質(zhì)中的 EU 含量小于 0.1。
產(chǎn)品形式:凍干粉,凍干緩沖液為無(wú)菌的 50mM NaCl動(dòng)?動(dòng)
背景
腫瘤壞死因子α(TNF-α),也稱為惡液質(zhì)素和TNFSF2,是由脂肪細(xì)胞、活化的單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞、T細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等多種細(xì)胞分泌的多效性促炎細(xì)胞因子。它屬于T腫瘤壞死因子配體家族,可通過(guò)兩個(gè)受體TNFR1和TNFR2發(fā)出信號(hào)。 TNF-α對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有細(xì)胞毒性,是介導(dǎo)針對(duì)細(xì)菌感染的免疫反應(yīng)的重要因素。TNF-α還在感染性休克,自身免疫性疾病,類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎,炎癥和糖尿病的誘導(dǎo)中也起作用。
本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1.操作簡(jiǎn)便、快捷??芍苯蛹尤氲綑z測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。
2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。
4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品:
ARIP2a(Activin receptor 2A 0.5mgARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原
CLEC12A Protein Human 重組人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 蛋白
IL36RN重組小鼠 IL1F5 / IL1RP3 蛋白 Protein
ERBB4 Protein Rat 重組大鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
MAPKAPK5重組人 MAPKAPK5 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human rotavirus aigen (RV Ag) ELISA Kit 人輪狀病毒抗原(RV Ag)檢測(cè)試劑盒
HumanPhospholipaseCγ1,PLCγ1ELISAKit 人0酯酶Cγ鏈(PLCγ1)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Duckcarbonicanhydrase,CA檢測(cè)試劑盒鴨子酶(CA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒(針對(duì)二甲基、基)10/20次
MouseDopamineD1receptor,D1RELISAKit小鼠多巴胺D1受體(D1R)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠6前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠戊糖素(Peosidine)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISAKit ELISA. 96T/48T
大鼠乳酸脫氫酶B(LDHB)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: LDHB ELISA Kit
Mouse vasoactive iestinal peptide (VIP) ELISA Kit 小鼠血管活性腸肽(VIP)檢測(cè)試劑盒
Ratsexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit 大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGzms-B(MousegranzymesB)ELISAKit小鼠顆粒酶B
細(xì)胞二(MDA)比色法定量檢測(cè)試劑盒50次
RatVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
重組大鼠腫瘤壞死因子-α(TNF-α)IL36RN重組小鼠 IL1F5 / IL1RP3 蛋白 Protein
ARIP2a(Activin receptor 2A 0.5mgARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原
MAPKAPK5重組人 MAPKAPK5 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CLEC12A Protein Human 重組人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 蛋白
ERBB4 Protein Rat 重組大鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
操作步驟:
(一)獲得目的基因
1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。
2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。
(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體
1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。
2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。
(三) 獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種
1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。
2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。
3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。
(四)誘導(dǎo)表達(dá)
1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。
2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。
3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。
4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。
5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。
如果你對(duì)重組大鼠腫瘤壞死因子-α(TNF-α)感興趣,想了解更詳細(xì)的產(chǎn)品信息,填寫下表直接與廠家聯(lián)系: |