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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Human FGF-17 Protein

產(chǎn)品中文名稱：重組人成纖維細胞生長因子17（FGF-17）

規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號：EY-01X8694
用途：僅供科研研究實驗

特點&優(yōu)勢:

表達宿主:大腸桿菌

種屬:人

序列:氨基酸序列來源于：人FGF17 (Thr23-Thr216) (O60258-1) 表達的蛋白片段。

活性:Testing in progress.

蛋白長度：重組人FGF17 由194個氨基酸組成，預(yù)測分子量為22.7 KD。

純度:> 98% ，使用SDS-PAGE檢測

通過LAL法測定，每微克蛋白里內(nèi)毒素含量<0.1 EU。

產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無菌的20 mM Tris，50 mM NaCl，pH 8.0。

基因ID:8822

使用中注意事項:開蓋使用動?動

背景

Fibroblast Growth Factor 17(FGF-17) is a member of the heparin - binding growth factors family that is prominently expressed in the cerebellum and cortex. Proteins of this family possess broad mitogenic and cell survival activities and they are involved in a variety of biological processes including embryonic development cell growth, morphogenesis, tissue repair, tumor growth, and invasion. FGF-17 plays an important role in the regulation of embryonic development and it acts as signaling molecule in the induction and patterning of the embryonic brain. In addition, FGF-17 stimulates the proliferation and activation of cells that express FGF receptors.

本產(chǎn)品具有下列特點:

 1.操作簡便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

CA125 卵巢癌抗原 0.2mgCA125 卵巢癌抗原

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CA125 卵巢癌抗原 0.2mgCA125 卵巢癌抗原

PON3重組人 PON3 / Paraoxonase 3 蛋白 (50 Ser/Asn, His 標(biāo)簽) Protein

CUTC Protein Human 重組人 CUTC / CGI-32 蛋白

TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達載體

1、載體酶切:將表達質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達質(zhì)粒的表達菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達宿主菌的感受態(tài)細胞。

(四)誘導(dǎo)表達

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。