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產(chǎn)品名稱:大鼠多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):大鼠多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株 Human 二氫還原酶缺陷型中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr- 食管癌細(xì)胞,TE-11細(xì)胞 B82細(xì)胞,鼠細(xì)胞系 人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A AAV-293細(xì)胞,人人胚腎細(xì)胞 大鼠心肌細(xì)胞,H9c2(2-1)
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-10
訪問次數(shù):29
大鼠多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠多巴胺神經(jīng)元分離腦組織;多巴胺神經(jīng)元,即:胺能神經(jīng)元,主要指含多巴胺的神經(jīng)元,其細(xì)胞體主要分布在黑質(zhì)、腳間核和丘腦下部等處。在這些區(qū)域多巴胺含量很高。多巴胺在機(jī)體內(nèi)合成時(shí)以酪為原料。腦內(nèi)的多巴胺主要是由黑質(zhì)細(xì)胞來合成,這些多巴胺參與錐體外系統(tǒng)的活動(dòng),與軀體運(yùn)動(dòng)機(jī)能有密切關(guān)系。腦內(nèi)多巴胺代謝失常時(shí),可引起震顫性麻痹(帕金森震顫)。多巴胺(Dopamine),是NA的前體物質(zhì),是下丘腦和腦垂體腺中的一種關(guān)鍵神經(jīng)遞質(zhì),中樞神經(jīng)系統(tǒng)中多巴胺的濃度受精神因素的影響,神經(jīng)末梢的GnRH和多巴胺間存在著軸突聯(lián)系并相互作用,以及多巴胺有抑制GnRH分泌的作用。中腦的神經(jīng)原物質(zhì)多巴胺(Dopamine),則直接影響人們的情緒。從理論上來看,增加這種物質(zhì),就能讓人興奮,但是它會(huì)令人上癮。多巴胺在前腦和基底神經(jīng)節(jié)(Basal Ganglia)出現(xiàn),基底神經(jīng)節(jié)負(fù)責(zé)處理恐懼的情緒,但由于多巴胺的緣故,取代了恐懼的感覺,因此有很多人的上癮行為,都是因多巴胺而起的。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞 | 組織來源 | 腦組織 |
英文名稱 | Rat Dopamine Neuron Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠多巴胺神經(jīng)元采用消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠多巴胺神經(jīng)元經(jīng)TH免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: PPAR-γ ELISA Kit
Rabbit angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 兔血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)檢測(cè)試劑盒
腸道病毒通用型(EV-U)核酸檢測(cè)試劑盒(-PCR法) 48T
CLIAKitforMN(Humanmetanephrine)ELISAKit人變
體液基質(zhì)金屬蛋白酶125I同位素標(biāo)記檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitISR-β犬胰島素受體β
IL4重組狗 IL4 / Interleukin-4 蛋白 Protein
Oct-4(Octamer-4 0.5mgOct-4(Octamer-4) 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗原
NLGN1重組人 Neuroligin 1 / NLGN1 蛋白 Protein
CARTPT Protein Human 重組人 CART / CARTPT 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
GPC3 Protein Mouse 重組小鼠 Glypican 3 / GPC3 / OCI-5 蛋白
Oct-4(Octamer-4 0.5mgOct-4(Octamer-4) 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗原
CARTPT Protein Human 重組人 CART / CARTPT 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL4重組狗 IL4 / Interleukin-4 蛋白 Protein
GPC3 Protein Mouse 重組小鼠 Glypican 3 / GPC3 / OCI-5 蛋白
NLGN1重組人 Neuroligin 1 / NLGN1 蛋白 Protein
小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai mouse aibody (HAMA) ELISA Kit 人抗鼠抗體(HAMA)檢測(cè)試劑盒
Human20-hydroxyeicosateaenoicacid,12-HETEELISAKit 人12羥二十烷四烯酸(12-HETE)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforACE(MouseAngiotensinconveingenzyme)ELISAKit小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶
藥品甘素(dulcin)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次
Mouseperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞鴨子酶(CA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
中文名稱 方法 規(guī)格
鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
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