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產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Mouse 大鼠肝細(xì)胞瘤;H4-II-E-C3 結(jié)腸腺癌細(xì)胞,CW-2細(xì)胞 R1610細(xì)胞,中國(guó)倉(cāng)鼠倉(cāng)鼠肺細(xì)胞 人細(xì)胞;Hela C6-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 C6-EGFP-puro (leiviral
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-10
訪問(wèn)次數(shù):23
大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠睪丸間質(zhì)分離自睪丸組織;睪丸間質(zhì)細(xì)胞成群分布在曲精小管之間,胞體呈圓形,橢圓形或不規(guī)則形,胞體較大,直徑約20μm,胞質(zhì)呈嗜酸性,細(xì)胞核呈圓形或卵圓形,常位于中央,染色較淡,有1~2個(gè)核仁線粒體多,呈管嵴狀,無(wú)分泌顆粒。從青春期開(kāi)始,睪丸間質(zhì)細(xì)胞受垂體前葉嗜堿性細(xì)胞分泌的間質(zhì)細(xì)胞刺激素(黃體生成素)的作用,能合成分泌雄性激素,可促進(jìn)的發(fā)生和男性生殖器官發(fā)育,以及維持性征和性功能。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 睪丸組織 |
英文名稱(chēng) | Rat Testicular Mesenchymal Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠睪丸間質(zhì)采用膠原酶消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠睪丸間質(zhì)經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶(hù)自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
中文名稱(chēng) 方法 規(guī)格
小鼠25羥基D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISAKit ELISA.
小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISAKit ELISA.
小鼠C(VC)ELISAKit ELISA.
豬補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA 試劑盒
Human Legionella aigen (LP Ag) ELISA Kit 人軍團(tuán)菌抗原(LP Ag)試劑盒
PorcinecardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISAKit 豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforALG(Humanai-lymphocyteglobulin)ELISAKit人抗淋巴細(xì)胞球蛋白
血液卵0脂乙酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)活性熒光定量試劑盒20次
MouseVitaminC,VCELISAKit小鼠C(VC)試劑盒
CNTN3重組人 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (708 Asp/Asn, His 標(biāo)簽) Protein
卵泡抑素(FS)重組蛋白 Recombinant Follistatin (FS)
SBDS重組人 SBDS / Shwachman-Bodian-Diamond syndrome 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ALDH1A1 Protein Human 重組人 ALDH1 / ALDH1A1 / ALDC 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
卵泡抑素(FS)重組蛋白 Recombinant Follistatin (FS)
ALDH1A1 Protein Human 重組人 ALDH1 / ALDH1A1 / ALDC 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CNTN3重組人 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (708 Asp/Asn, His 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SBDS重組人 SBDS / Shwachman-Bodian-Diamond syndrome 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA 試劑盒
Rat alternative macrophage activation associated chemical factor 1 (AmAC-1) ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)試劑盒
Humanai-matedciullinatedvimeinaibody,MCVELISAKit 人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanAlanineAminoansferase,ALT/GPT試劑盒人轉(zhuǎn)氨酶/谷轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)試劑盒
植物O-糖基糖蛋白化試劑盒5次
Mouse8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)試劑盒
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