- 重組人Fas配體,His-SUMO標(biāo)簽無動(dòng)物源FasL?雙12
- 大鼠胰島干細(xì)胞;ALLRPISC2012優(yōu)惠活動(dòng)
- 人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10?
- 大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞;RS1優(yōu)惠活動(dòng)
- 如何正確存儲(chǔ)E2檢測(cè)ELISA試劑盒?
- 人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒?”十月節(jié)日過后的專屬優(yōu)惠活動(dòng)
- 黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S2?
- 庚肝抗體IgM檢測(cè)試劑盒的工作原理與應(yīng)用解析
- 大鼠多巴胺(DA)elisa試劑盒?開學(xué)季特惠”與中秋團(tuán)圓禮包活動(dòng)火熱進(jìn)行
- 大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞;RM1九月開學(xué)季優(yōu)惠活動(dòng)
產(chǎn)品名稱:大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)
產(chǎn)品特點(diǎn):大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)公司正在出售的產(chǎn)品BST1 Others Rat 大鼠 CD157 / BST1 人細(xì)胞裂解液 FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人細(xì)胞裂解液 CM-M065小鼠腎上皮細(xì)胞培養(yǎng)基原代上皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-10
訪問次數(shù):33
大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠骨髓樹突狀分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細(xì)胞是由骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的;樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未成熟樹突狀細(xì)胞,典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強(qiáng)的遷移能力,伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞,貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成,多數(shù)呈懸浮生長, 細(xì)胞呈圓形,細(xì)胞體積進(jìn)一步增大,表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞。未成熟DC細(xì)胞長時(shí)間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細(xì)胞尚無特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志,主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進(jìn)行鑒定。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進(jìn)而激活T淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié);未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強(qiáng)的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答,不能激活T細(xì)胞的信號(hào),可導(dǎo)致T細(xì)胞無能,從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細(xì)胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低,一般在30%以下。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞) | 組織來源 | 骨髓 |
英文名稱 | Rat Bone Marrow Immature Dendritic Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨髓未成熟DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨髓樹突狀(未成熟DC細(xì)胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細(xì)胞形態(tài)等綜合鑒定,純度可達(dá)80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài):圓形、梭形、多角形,形態(tài)多樣
傳代特性:屬于高度分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠骨髓樹突狀(未成熟DC細(xì)胞)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠(AZT)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: AZT ELISA Kit
Porcine somatostatin (SS) ELISA Kit 豬(SS)檢測(cè)試劑盒
木瓜特定基因序列(Papaya)核酸檢測(cè)試劑盒 48T
CLIAKitforLTB4ELISAKit大鼠白三烯B4
體液組織蛋白酶L(CATHEPSINL)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitHSP-40雞熱休克蛋白40
HA重組甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
rHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein 100ugrHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein) 重組乙肝病毒e抗原
VNN1重組人 VNN1 / Vanin-1 蛋白 Protein
CCL16 Protein Human 重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白
GZMH Protein Human 重組人 Granzyme H 蛋白
rhBMP-2/BMP2 重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2 100ugrhBMP-2/BMP2 重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2
CCL16 Protein Human 重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白
HA重組甲型流感 H6N1 (A/northern shoveler/California/HKWF115/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
HAPLN1 Protein Human 重組人 HAPLN1 蛋白
CCNA1重組人 CCNA1 / Cyclin-A1 蛋白 Protein
小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human anspoer associated with aigen processing (TAP) ELISA Kit 人抗原處理相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAP)檢測(cè)試劑盒
Humahymusindependeaigen,TI-AgELISAKit 人非依賴性抗原(TI-Ag)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAAA(Humanai-Actinaibody)ELISAKit人抗肌動(dòng)蛋白抗體
胰腺脂酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Mouseneurofilameprotein,NFELISAKit小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)血清鐵 英文名稱: Human serum Lron 規(guī)格: 英文縮寫: Lron
可溶性ENG/sCD105 英文名稱: Human soluble Endoglin 規(guī)格: 英文縮寫: ENG/sCD105
可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1 英文名稱: Human soluble Fms.liketyrosinekinase Receptor 1 規(guī)格: 英文縮寫: sFLt-1
可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1 英文名稱: Human Soluble Fms-like Tyrosine Kinase 1/sVEGFR1 規(guī)格: 英文縮寫: SFLT1
如果你對(duì)大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)感興趣,想了解更詳細(xì)的產(chǎn)品信息,填寫下表直接與廠家聯(lián)系: |