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產(chǎn)品中心Products 當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 原代細(xì)胞 > 大鼠原代細(xì)胞 > 產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品名稱:大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品特點(diǎn):大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 人細(xì)胞裂解液 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-acf CL-0355HFT-8810(人胎兒細(xì)胞株) 中國倉鼠肺細(xì)胞;CHL NCI-H661 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 A2780/Taxol? 人卵巢癌耐藥株

產(chǎn)品型號:

更新日期:2024-12-10

訪問次數(shù):27

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞的詳細(xì)資料:

細(xì)胞簡介:

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞

大鼠角膜內(nèi)皮分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。角膜的高度透明性和光學(xué)性是正常發(fā)揮生理功能的必要條件之一,而角膜內(nèi)皮細(xì)胞(CEC)在維持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜內(nèi)皮細(xì)胞是角膜內(nèi)層的單層細(xì)胞,構(gòu)成了后彈力層和房水之間的物理屏障,通過離子“泵"功能調(diào)節(jié)角膜中離子濃度和水分,維持角膜的半脫水狀態(tài),保證角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜內(nèi)皮細(xì)胞功能出現(xiàn)紊亂,常導(dǎo)致角膜水腫而使角膜部分甚至失去透明性。角膜內(nèi)皮細(xì)胞主要功能有:①角膜是的無血管的組織,具有透明的特性和合成許多蛋白的功能;②角膜內(nèi)皮細(xì)胞對角膜透明性有重要作用;③角膜內(nèi)皮細(xì)胞通過Na+-K+-ATP酶活性,維持角膜和房水內(nèi)Na+梯度,防止水分滲入角膜內(nèi),維持角膜實(shí)質(zhì)層相對脫水狀態(tài),維持透明性。

產(chǎn)品名稱

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞

組織來源

眼角膜組織

英文名稱

Rat Corneal   Endothelial Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡介:

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠角膜內(nèi)皮采用混合膠原酶消化結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠角膜內(nèi)皮經(jīng)NSE(神經(jīng)元特異性烯醇化酶)免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞

包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞


實(shí)驗(yàn)報告:

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞

脂褐質(zhì)測試盒   Lipfuscin test box

脂蛋白(a[LPa]測試盒   Lipoprotein (a) [LP (a)] test case

游離脂肪酸(NEFA)測試盒   Free fatty acid (NEFA) test case

脂肪酶測試盒   Lipase test kit

植物B6(VB6)ELISA 試劑盒

Human ai Toxoplasma IgM aibody (ai-tox IgM) ELISA Kit 人抗弓形體IgM抗體(ai-tox IgM)試劑盒

PorcineFibrinogen,FbgELISAKit 豬血纖蛋白原(Fbg)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAFP甲胎蛋白定性

血液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶1(ACE1)活性比色法定量試劑盒20

Mousethioredoxieductase,xRELISAKit小鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)試劑盒

TFPI重組人 TFPI 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

胰淀素(IAPP)重組蛋白 Recombinant Islet Amyloid Polypeptide (IAPP)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ACVRL1 Protein Human 重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

M. VIRIDIFACIENS NA Protein M.viridifaciens 重組綠色小單孢菌 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 標(biāo)簽)

胰淀素(IAPP)重組蛋白 Recombinant Islet Amyloid Polypeptide (IAPP)

ACVRL1 Protein Human 重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TFPI重組人 TFPI 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

M. VIRIDIFACIENS NA Protein M.viridifaciens 重組綠色小單孢菌 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞小鼠α半乳糖基抗體(Gal)ELISA 試劑盒

Rat aquaporin 2 (AQP-2) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒

Humanprogesteronereceptor,PGRELISAKit 人孕酮受體(PGR)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanChorionicGonadoophin,HCG試劑盒人絨毛膜(HCG)試劑盒

總微型RNA(miRNA)電泳法分離試劑盒20

HumanSalmonellatyphiaigen,St-AgELISAKit人傷寒抗原(St-Ag)試劑盒

注意事項(xiàng):

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。



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