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產(chǎn)品名稱:大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞
產(chǎn)品特點:大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 人細(xì)胞裂解液 BALL-1人B淋巴細(xì)胞急性白血病細(xì)胞 BALL-1 B acute lymphoblastic leukemia cells 90%RPMI1640(內(nèi)含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清 CM-R070
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-12-10
訪問次數(shù):27
大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡介:
大鼠結(jié)腸黏膜上皮分離自結(jié)腸組織;結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分,大部分固定于腹后壁,結(jié)腸的排列酷似英文字母“M",將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為:黏膜(上皮層、固有層、黏膜肌層),黏膜下層(疏松結(jié)締組織),肌層(內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑?。?,外膜(纖維膜或漿膜)。腸黏膜上皮細(xì)胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的道防線。因此,腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞,在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強度。探討正常結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞的分離、體外培養(yǎng)方法,為研究腸黏膜上皮細(xì)胞以及與腸黏膜相關(guān)疾病建立合適的細(xì)胞模型。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞 | 組織來源 | 結(jié)腸組織 |
英文名稱 | Rat Colonic Mucosal Epithelial Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠結(jié)腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠結(jié)腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠酶原顆粒膜糖蛋白(GP2)檢測試劑盒 ,英文名: GP2 ELISA Kit
Mouse insulin like growth factor 2 (IGF-2) ELISA Kit 小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)檢測試劑盒
RatAmylinELISAKit 大鼠胰淀素(Amylin)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGelsolinELISAKit大鼠凝溶膠蛋白
細(xì)胞甘油三酯(iglyceride)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次
Ratsolubleclusterofdiffereiation14,sCD14ELISAKit大鼠可溶性CD14(sCD14)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
HA重組甲型流感 H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子 0.5mgPAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子
ICOSLG重組人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 Protein
ESM1 Protein Human 重組人 ESM1 / Endocan 蛋白
ANGPT2 Protein Human 重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子 0.5mgPAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子
ESM1 Protein Human 重組人 ESM1 / Endocan 蛋白
HA重組甲型流感 H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
ANGPT2 Protein Human 重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ICOSLG重組人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 Protein
小鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human platelet aibody IgG/M/A (PA-IgG/M/A) ELISA Kit 人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)檢測試劑盒
Humandeubiquitinatingenzyme,DUBELISAKit 人泛素分解酶(DUB)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforABP(HumanAndrogenBindingProtein)ELISAKit人雄激素結(jié)合蛋白
合成酶(NOS)總活性終點比色法定量檢測試劑盒50/100次
MouseN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKit小鼠N端前腦素(-proBNP)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞小鼠癌標(biāo)志物CA125ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
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