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產(chǎn)品名稱:大鼠脾臟單核細胞

產(chǎn)品特點:大鼠脾臟單核細胞公司正在出售的產(chǎn)品CL-0384MDA-MB-468-06(人癌細胞) BIU-87(人膀胱癌細胞) SAE1 Others Human 人 SAE1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 IL1R1 Others Mouse 小鼠 IL1R1 / CD121a 人細胞裂解液 PC9-EGFP-puro

產(chǎn)品型號:

更新日期:2024-12-10

訪問次數(shù):31

大鼠脾臟單核細胞的詳細資料:

大鼠脾臟單核細胞

實驗報告:

大鼠脾臟單核細胞
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細胞簡介:

大鼠脾臟單核細胞

大鼠脾臟單核分離自脾臟組織;脾臟是機體大的免疫器官,占全身淋巴組織總量的25%,含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞,是機體細胞免疫和體液免疫的中心。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處,與911肋相對,長軸與第10肋一致。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰,前方有胃,后方與左腎、左腎上腺毗鄰,下端與結(jié)腸脾溝相鄰,地柔軟的網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞器官。單核細胞(monocytes)是體積大的白細胞。其細胞核常偏位,呈多形性,如卵圓形、腎形(a)、馬蹄形(b)、不規(guī)則形(c)等,常有折疊感(c);染色質(zhì)呈疏松網(wǎng)狀,著色較淺。胞質(zhì)較多,嗜堿性,但因含大量細小的嗜天青顆粒而染成灰藍色,顆粒含過氧化物酶。單核細胞是血液中大的血細胞。目前認為它是巨噬細胞的前身,具有明顯的變形運動,能吞噬、清除受傷、衰老的細胞及其碎片。單核細胞還參與免疫反應(yīng),在吞噬抗原后將所攜帶的抗原決定簇轉(zhuǎn)交給淋巴細胞,誘導(dǎo)淋巴細胞的特異性免性反應(yīng)。單核細胞也是對付細胞內(nèi)致病細菌和寄生蟲的主要細胞防衛(wèi)系統(tǒng),還具有識別和殺傷腫瘤細胞的能力。淋巴細胞則為具有特異性免疫功能的細胞。T淋巴細胞主要參與細胞免疫反應(yīng)而B淋巴細胞參與體液免疫反應(yīng)。

產(chǎn)品名稱

大鼠脾臟單核細胞

組織來源

脾臟

英文名稱

Rat Spleen   Monocyte Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡介:

大鼠脾臟單核細胞

實驗室分離的大鼠脾臟單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的大鼠脾臟單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

大鼠脾臟單核細胞

培養(yǎng)基:含FBS、M-CSFPenicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:半貼壁半懸浮

細胞形態(tài):巨噬細胞樣

傳代特性:不傳代,不增殖,存活1-2

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠脾臟單核體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

大鼠脾臟單核細胞

注意事項:

大鼠脾臟單核細胞
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠脾臟單核細胞

小鼠白介素18(IL-18)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

(TM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人Ⅶ(F)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠活化蛋白C(APC)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat lymphocyte chemotactic factor (Lptn/LTN/XCL1) ELISA Kit 大鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)試劑盒

humanfreechorionicgonadoopin,f-βhCGELISAKIT 人游離β絨毛膜(f-βhCG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-Monocyteaibody,AMA試劑盒人抗單核細胞抗體(AMA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物葡萄糖6-0酸異構(gòu)酶(glucose-6-phosphateisomerase;GPI)電泳分析試劑盒5

Humanurokinase,UKELISAKit(UK)試劑盒規(guī)格:96T/48T

IL11RA重組狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白 Protein

NOS-2 peptide 合成酶-2多肽抗原 0.5mgNOS-2 peptide 合成酶-2多肽抗原

CSNK2A1重組人 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (GST 標簽) Protein

ERBB3 Protein Human 重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 標簽)

SELE Protein Mouse 重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (Fc 標簽)

NOS-2 peptide 合成酶-2多肽抗原 0.5mgNOS-2 peptide 合成酶-2多肽抗原

ERBB3 Protein Human 重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 標簽)

IL11RA重組狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白 Protein

SELE Protein Mouse 重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (Fc 標簽)

CSNK2A1重組人 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (GST 標簽) Protein

大鼠脾臟單核細胞大鼠白介素6(IL-6)試劑盒 ,英文名: IL-6 ELISA Kit

Mouse ierleukin 1 alpha (IL-1 alpha) ELISA Kit 小鼠白介素1α(IL-1α)試劑盒

ELISA 小鼠熱休克蛋白60(mouse Hsp-60)  進口分裝

CLIAKitforINS(HumanInsulin)ELISAKit人胰島素

通用型副氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定量PCR擴增試劑盒20

ELISAKitApo-H大鼠載脂蛋白H


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