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產(chǎn)品名稱:大鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):大鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品CL-0421RAG(小鼠腎腺癌細(xì)胞) ZR-75-30(人癌細(xì)胞) NOTCH1 Others Mouse 小鼠 Notch-1 / NOTCH1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 PKM Others Mouse 小鼠 PKM2 / OIP3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-10
訪問(wèn)次數(shù):29
大鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮分離自臍帶組織;它是臍動(dòng)脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一,在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu),臍帶中通過(guò)尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動(dòng)脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管,與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運(yùn)送至胎盤,臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 臍帶 |
英文名稱 | Rat Umbilical Artery Endothelial Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: MCP-4/CCL13 ELISA Kit
Porcine insulin-like growth factor 2 (IGF-2) ELISA Kit 豬胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)檢測(cè)試劑盒
ELISA 小鼠抗核抗體(mouse ANA) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLp-AlphaELISAKit大鼠脂蛋白α
通用型CHIPDNA分子庫(kù)構(gòu)建試劑盒10次
ELISAKitIL-3雞白介素3
IL13RA2重組人 IL13RA2 / IL13R 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
瘦素受體(LEPR)重組蛋白 Recombinant Leptin Receptor (LEPR)
LIF重組人 LIF 蛋白 Protein
CD1D Protein Human 重組人 CD1D / R3G1 蛋白
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
瘦素受體(LEPR)重組蛋白 Recombinant Leptin Receptor (LEPR)
CD1D Protein Human 重組人 CD1D / R3G1 蛋白
IL13RA2重組人 IL13RA2 / IL13R 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
LIF重組人 LIF 蛋白 Protein
小鼠原激活肽(TAP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble endothelial protein C receptor (sEPCR) ELISA Kit 人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)檢測(cè)試劑盒
HumanSolubleAdenylateCyclase,sACELISAKit 人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor17-OHCS(Human17-Hydroxycoicosteroids)ELISAKit人17羥皮質(zhì)類固醇
飲料精(arginine)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次
MouseLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit小鼠白三烯B4(LTB4)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞小鼠組織蛋白去乙?;?span>(HD)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠雌三醇(E3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠雄烯二(ASD)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠游離睪(F-TESTO)ELISAKit ELISA. 96T/48T
如果你對(duì)大鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞感興趣,想了解更詳細(xì)的產(chǎn)品信息,填寫下表直接與廠家聯(lián)系: |