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產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠退行性椎間盤(pán)髓核細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):大鼠退行性椎間盤(pán)髓核細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品CXCL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 (His 標(biāo)簽) C26瘤 結(jié)腸癌 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF SMMC-7721人肝癌細(xì)胞 SMMC-7721 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS 2. 皮膚細(xì)胞系統(tǒng)
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-11
訪問(wèn)次數(shù):23
大鼠退行性椎間盤(pán)髓核細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠退行性椎間盤(pán)髓核分離退行性椎間盤(pán)組織;椎間盤(pán)是位于脊柱兩椎體之間,分為中央部的髓核,富于彈性的膠狀物質(zhì);周?chē)康睦w維環(huán),由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板,是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來(lái)。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。髓核,是乳白色半透明膠狀體,富于彈性,為椎間盤(pán)結(jié)構(gòu)的一部分,位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯(cuò)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時(shí)期的髓核含水量為80%-90%,即使到了老年,其含水量也在70%上下。髓核在出生時(shí)體積大而松散,位于椎間盤(pán)的中央,至成年時(shí)位置移至椎間盤(pán)的中后部;在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨,隨著年齡的增長(zhǎng),髓核中的蛋白多糖解聚增多,水分逐漸減少,膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠退行性椎間盤(pán)髓核細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 椎間盤(pán) |
英文名稱(chēng) | Rat Degenerative Intervertebral Disc Nucleus Pulposu Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠退行性椎間盤(pán)髓核采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠退行性椎間盤(pán)髓核經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每3-4天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠退行性椎間盤(pán)髓核體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶(hù)自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠氧化酶(DAO)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: DAO ELISA Kit
Porcine coisol (Coisol) ELISA Kit 豬(Coisol)檢測(cè)試劑盒
特定基因序列(Deer)核酸檢測(cè)試劑盒 48T
CLIAKitforM2-PK(HumanPyruvateKinase)ELISAKit人同酸激酶M2型同工酶
體液總膽汁酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitACAC雞乙酰乙酸檢測(cè)
LIFR重組人 LIFR / CD118 蛋白 Protein
血紅蛋白μ(HBμ)重組蛋白 Recombinant Hemoglobin Mu (HBm)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
CD3D Protein Human 重組人 CD3d / CD3 delta 蛋白
GP140 Protein HIV 重組人類(lèi)免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC) (Fc 標(biāo)簽)
血紅蛋白μ(HBμ)重組蛋白 Recombinant Hemoglobin Mu (HBm)
CD3D Protein Human 重組人 CD3d / CD3 delta 蛋白
LIFR重組人 LIFR / CD118 蛋白 Protein
GP140 Protein HIV 重組人類(lèi)免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC) (Fc 標(biāo)簽)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat catecholamine (CA) ELISA Kit 大鼠兒茶酚胺(CA)檢測(cè)試劑盒
Humanβ-glucosidaseELISAKit 人β葡糖苷酶(β-glucosidase)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor乙型肝二對(duì)半全套
營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑L-天化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
MouseIerleukin11,IL-11ELISAKit小鼠白介素11(IL-11)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠退行性椎間盤(pán)髓核細(xì)胞小鼠乙型肝e抗體(HBeAb)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠乙型肝e抗原(HBeAg)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠乙型肝表面抗體(HBsAb)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠氧化酶(DAO)ELISAKit ELISA. 96T/48T
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