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產(chǎn)品名稱:人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)

產(chǎn)品特點:人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)公司正在出售的產(chǎn)品IFNGR1 Others Human 人 IFN-gamma R1 人細胞裂解液 KLRC1 Others Mouse 小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細胞裂解液 PRMT5 Others Human 人 PRMT5 人細胞裂解液

產(chǎn)品型號:

更新日期:2024-12-11

訪問次數(shù):29

人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)的詳細資料:

細胞簡介:

人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)

人骨髓樹突狀分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導(dǎo)而成的;樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞,典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,細胞大而形態(tài)不規(guī)則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內(nèi)細胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細胞,貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成,多數(shù)呈懸浮生長, 細胞呈圓形,細胞體積進一步增大,表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志,主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應(yīng)中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進而激活T淋巴細胞,誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié);未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答,不能激活T細胞的信號,可導(dǎo)致T細胞無能,從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低,一般在30%以下。

產(chǎn)品名稱

人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)

組織來源

骨髓

英文名稱

Human Bone Marrow   Immature Dendritic Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡介:

人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)

實驗室分離的人骨髓未成熟DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導(dǎo)而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的人骨髓樹突狀(未成熟DC細胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細 胞 形態(tài)等綜合鑒定,純度可達80%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:半貼壁半懸浮

細胞形態(tài):圓形、梭形、多角形,形態(tài)多樣

傳代特性:屬于高度分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

人骨髓樹突狀(未成熟DC細胞)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)


實驗報告:

人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)
公司正在出售的產(chǎn)品:
人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)

豬紅細胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒

One pit protein Caveolin1 (Cav-1) ELISA Kit 人窖蛋白Caveolin1(Cav-1)檢測試劑盒

Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISAKit 豬髓0脂堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAlpha-GST(HumanAlpha-glathioneS-ansferases)ELISAKit人αS轉(zhuǎn)移酶

血液結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量檢測試劑盒20

Plagrowthhormone,GHELISAKit植物生長激素(GH)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

IFNA14重組小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 Protein

環(huán)腺苷二0酸核糖水解酶(cADPRH)重組蛋白 Recombinant Cyclic ADP Ribose Hydrolase (cADPRH)

DCUN1D1重組人 DCUN1D1 / SCCRO 蛋白 Protein

CES2 Protein Human 重組人 CES2 / Carboxylesterase-2 蛋白

IL18R1 Protein Canine 重組狗 IL18R1 蛋白 (Fc 標簽)

環(huán)腺苷二0酸核糖水解酶(cADPRH)重組蛋白 Recombinant Cyclic ADP Ribose Hydrolase (cADPRH)

CES2 Protein Human 重組人 CES2 / Carboxylesterase-2 蛋白

IFNA14重組小鼠 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 Protein

IL18R1 Protein Canine 重組狗 IL18R1 蛋白 (Fc 標簽)

DCUN1D1重組人 DCUN1D1 / SCCRO 蛋白 Protein

小鼠脫氫表雄酮(DHEA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human heparan sulfate proteoglycan (HSPG) ELISA Kit 人肝素糖蛋白(HSPG)檢測試劑盒

Humansupperaigen,SagELISAKit 人超抗原(Sag)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenPlateletFactor4,PF-4檢測試劑盒雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

載玻片細胞PAR-2蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

MouseFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit小鼠FMS樣酪激酶3(Flt3)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)小鼠脫氧酚檢測試劑盒   小鼠脫氧酚試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠脫氧酚試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠脫氧酚試劑盒、小鼠脫氧酚eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

小鼠粘蛋白檢測試劑盒   小鼠粘蛋白試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠粘蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠粘蛋白試劑盒、小鼠粘蛋白eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

小鼠β葡糖苷酶檢測試劑盒   小鼠β葡糖苷酶試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠β葡糖苷酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠β葡糖苷酶試劑盒、小鼠β葡糖苷酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

小鼠β葡萄糖酸苷酶檢測試劑盒   小鼠β葡萄糖酸苷酶試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠β葡萄糖酸苷酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠β葡萄糖酸苷酶試劑盒、小鼠β葡萄糖酸苷酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

注意事項:

人骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。


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