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產(chǎn)品名稱:人關(guān)節(jié)軟骨細胞
產(chǎn)品特點:人關(guān)節(jié)軟骨細胞公司正在出售的產(chǎn)品IL17RB Others Human 人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 人細胞裂解液 HK-2(人小管上皮細胞) CL-0310VE(人血管內(nèi)皮細胞) 支原體PCR檢測試劑盒MYCO 卵巢顆粒細胞Many types of cells
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-12-11
訪問次數(shù):23
人關(guān)節(jié)軟骨細胞的詳細資料:
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介:
人關(guān)節(jié)軟骨分離自關(guān)節(jié)軟骨組織;關(guān)節(jié)軟骨屬于透明軟骨,表面光滑、呈淡藍色、有光澤,它是由一種特殊的叫做致密結(jié)締組織的膠原纖維構(gòu)成的基本框架,這種框架呈半環(huán)形,類似拱形球門,其底端緊緊附著在下面的骨質(zhì)上,上端朝向關(guān)節(jié)面,這種結(jié)構(gòu)使關(guān)節(jié)軟骨緊緊與骨結(jié)合起來而不會掉下來,同時當(dāng)受到壓力時候,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間,散在分布著軟骨細胞,軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,這些軟骨細胞維持關(guān)節(jié)軟骨的正常代謝。關(guān)節(jié)軟骨沒有神經(jīng)支配,也沒有血管,其營養(yǎng)成分必須從關(guān)節(jié)液中取得,而其代謝廢物也必須排至關(guān)節(jié)液中,關(guān)節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關(guān)節(jié)運動,使關(guān)節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行,所以關(guān)節(jié)運動對于維持關(guān)節(jié)軟骨的正常結(jié)構(gòu)起重要的作用。關(guān)節(jié)軟骨細胞位于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行,越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形、染色淺,細胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi),這些關(guān)節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,關(guān)節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,關(guān)節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
產(chǎn)品名稱 | 人關(guān)節(jié)軟骨細胞 | 組織來源 | 關(guān)節(jié)軟骨組織 |
英文名稱 | Human Articular Chondrocyte Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
公司實驗室分離的人關(guān)節(jié)軟骨采用膠原酶聯(lián)合消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人關(guān)節(jié)軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠組蛋白乙?;D(zhuǎn)移酶1(HAT1)檢測試劑盒 ,英文名: HAT1 ELISA Kit
Nude mouse protein phosphatase (PP) ELISA Kit 裸鼠蛋酸酶(PP)檢測試劑盒
MouseIerleukin-7,IL-7ELISAkit 小鼠白介素7(IL-7)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanmajorhistocompatibilitycomplexI,MHCI/HLAIELISAKit人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類
土壤α活性DNS比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitACA-IgM大鼠抗心0脂抗體IgM
EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein
熱休克蛋白47(HSP47)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein 47 (HSP47)
FAM20B重組人 FAM20B / Gxk1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CFH Protein Human 重組人 Complement Factor H / CFH 蛋白
NA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (R292K mutation) (高活性)
熱休克蛋白47(HSP47)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein 47 (HSP47)
CFH Protein Human 重組人 Complement Factor H / CFH 蛋白
EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein
NA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (R292K mutation) (高活性)
FAM20B重組人 FAM20B / Gxk1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL) ELISA Kit 大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)檢測試劑盒
HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISAKit 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickensolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCR檢測試劑盒雞可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞PDGF-A蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MouseFibrinogen,FbgELISAKit小鼠血纖蛋白原(Fbg)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
人關(guān)節(jié)軟骨細胞小鼠褪黑素(MT)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血小板因子3(PF-3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
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