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產(chǎn)品名稱:人滑膜成纖維細胞
產(chǎn)品特點:人滑膜成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細胞裂解液 EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞) CM-H086人大隱靜脈平滑肌細胞培養(yǎng)基胰腺星狀細胞Many BHK-21(倉鼠腎細胞)
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-12-11
訪問次數(shù):34
人滑膜成纖維細胞的詳細資料:
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介:
人滑膜成纖維分離自滑膜組織;滑膜組織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu),各種關(guān)節(jié)內(nèi)疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),同時在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關(guān)節(jié)炎(OA)以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?,其病理改變累及關(guān)節(jié)的各個組成部分,但絕不僅局限于軟骨,還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響,相互作用,共同加速關(guān)節(jié)的退變?;ぜ毎菢?gòu)成滑膜層的大細胞群體,是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),它包埋在顆粒狀無定性的基質(zhì)中,基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布。滑膜由A型(巨噬樣滑膜細胞)、B型(成纖維樣滑膜細胞)以及C型(樹突細胞樣滑膜細胞)細胞組成。
產(chǎn)品名稱 | 人滑膜成纖維細胞 | 組織來源 | 滑膜組織 |
英文名稱 | Human Synovial Fibroblast Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
公司實驗室分離的人滑膜成纖維采用混合酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人滑膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次;
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠抑制素B(INHB)檢測試劑盒 ,英文名: INHB ELISA Kit
Mouse immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit 小鼠免疫球蛋白M(IgM)檢測試劑盒
MouseP-SelectinELISAkit 小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanDiphtheriaaibodyELISAKit人白喉抗體
細胞Akt/PKB激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitsmActinin-α大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α
VNN1重組小鼠 VNN1 / Vanin-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
酸脫氫酶α(PDHα)重組蛋白 Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa)
CBFB重組人 CBFB / CBF-beta 蛋白 Protein
F7 Protein Human 重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白
PROCR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Epcr / PROCR 蛋白
酸脫氫酶α(PDHα)重組蛋白 Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa)
F7 Protein Human 重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白
VNN1重組小鼠 VNN1 / Vanin-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
PROCR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Epcr / PROCR 蛋白
CBFB重組人 CBFB / CBF-beta 蛋白 Protein
小鼠核因子κB抑制蛋白α(IKB-α)檢測試劑盒 96T/48T
Rat ovarian cancer marker-CA125 CA125 ELISA Kit 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125 檢測試劑盒
humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKIT 人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-Nogo-Aaibody,NOGO-AAb檢測試劑盒人NOGO-A抗體(Nogo-AAb)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物酸性0酸酶總活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanUlaSensitivegrowthhormone,US-GHELISAKit人超敏生長激素(US-GH)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
人滑膜成纖維細胞小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISAKit ELISA. 96T/48T
如果你對人滑膜成纖維細胞感興趣,想了解更詳細的產(chǎn)品信息,填寫下表直接與廠家聯(lián)系: |