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產(chǎn)品名稱:人胚肺成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品特點:人胚肺成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品LS 174T細(xì)胞,結(jié)腸腺癌細(xì)胞 鼠黑色素瘤細(xì)胞系,B16-F1細(xì)胞 人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;M619 CD8B Others Human 人 CD8B / P37 / LEU2 人細(xì)胞裂解液 3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞 小鼠肝癌細(xì)胞

產(chǎn)品型號:

更新日期:2024-12-12

訪問次數(shù):25

人胚肺成纖維細(xì)胞的詳細(xì)資料:

細(xì)胞簡介:

人胚肺成纖維細(xì)胞

人胚肺成纖維分離自胚肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的胚肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細(xì)胞在合成和分泌細(xì)胞因子、維持血管內(nèi)外和凝血和纖溶的的動態(tài)平衡中起重要作用。

產(chǎn)品名稱

人胚肺成纖維細(xì)胞

組織來源

胚胎;肺組織

英文名稱

Human Embryonic   Lung Fibroblast Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡介:

人胚肺成纖維細(xì)胞

公司實驗室分離的人胚肺成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的人胚肺成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

人胚肺成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

人胚肺成纖維細(xì)胞


實驗報告:

人胚肺成纖維細(xì)胞
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人胚肺成纖維細(xì)胞
公司正在出售的產(chǎn)品:
人胚肺成纖維細(xì)胞

小鼠銅藍蛋白(CP/CER)ELISA 試劑盒

Kappa B subunit p65 factor - nucleus of rat affinity peptide (NF- kappa B p65) ELISA Kit 大鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)檢測試劑盒

Humanserineprotease,PRSSELISAKit 人絲蛋白酶(PRSS)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1檢測試劑盒雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

載玻片細(xì)胞PI-3KINASEP110BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

MouseFcoagulationfactor,FELISAKit小鼠Ⅸ(F)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

重組大鼠 CD73 / NT5E 蛋白 Protein

DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5 0.5mgDR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5抗原

PRDX6重組人 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 蛋白 Protein

IL17RC Protein Human 重組人 IL17RC 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白

DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5 0.5mgDR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5抗原

IL17RC Protein Human 重組人 IL17RC 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

NT5E重組大鼠 CD73 / NT5E 蛋白 Protein

GHR Protein Mouse 重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白

PRDX6重組人 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 蛋白 Protein

豚鼠免疫球蛋白A(IgA)檢測試劑盒 ,英文名: IgA ELISA Kit

Human hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)檢測試劑盒

Monkeysolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 猴可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBidELISAKit大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白

細(xì)菌檸檬酸利用檢測試劑盒20

rabbitLeptin,LEPELISAKit兔子瘦素(LEP)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

人胚肺成纖維細(xì)胞腮腺病毒(MuV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

麻風(fēng)桿菌(ML)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

普氏立克次體(RP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

莫氏立克次體(RM)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

注意事項:

人胚肺成纖維細(xì)胞
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。


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