產(chǎn)品名稱:人臍帶血單核細胞
產(chǎn)品特點:人臍帶血單核細胞公司正在出售的產(chǎn)品LX-2, 人肝星形細胞株 Human RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞) 大鼠雪旺細胞;RSC96 Calu-6細胞,人肺癌細胞系(未分化) 大鼠肝星形細胞,CFSC-2G細胞 CM-M097小鼠皮下脂肪細胞培養(yǎng)基100mL
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-12-12
訪問次數(shù):21
人臍帶血單核細胞的詳細資料:
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介:
人臍帶血單核分離自臍帶血;臍帶血是胎兒娩出、臍帶結(jié)扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。近十幾年的研究發(fā)現(xiàn),臍帶血中含有可以重建造血和免疫系統(tǒng)的造血干細胞,可用于造血干細胞移植,因此,臍帶血已成為造血干細胞的重要來源。臍帶血中含有大量的干細胞,干細胞是生命的種子,它會分化成機體的各種細胞,結(jié)出各種不同的果實——血液細胞、神經(jīng)細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體;這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數(shù)量,又可進一步分化為各種組織細胞,從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。血液中的單核細胞來源于骨髓干細胞分化出的髓樣干細胞,是機體防御系統(tǒng)的一個重要組成部分。單核細胞能吞噬異物產(chǎn)生抗體,在機體損傷治愈、抗御病原的入侵和對疾病的免疫方面起著重要的作用。機體發(fā)生炎癥或其他疾病都可引起單核細胞總數(shù)百分比發(fā)生變化,因此,檢查單核細胞計數(shù)成為輔助診斷的一種重要方法。
產(chǎn)品名稱 | 人臍帶血單核細胞 | 組織來源 | 臍帶血 |
英文名稱 | Human Umbilical Cord Blood Monocyte Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
公司實驗室分離的人臍帶血單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人臍帶血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼壁半懸浮
細胞形態(tài) 圓形、巨噬細胞樣
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠蛋白激酶Cγ(PKCγ)檢測試劑盒 ,英文名: PKCγ ELISA Kit
N- acetyl - seryl - aspayl -- lysyl - proline (AcSDKP 人N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯(AcSDKP
RatIerleukin15,IL-15ELISAKIT 大鼠白介素15(IL-15)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforCXCR1(HumanCXC-chemokinereceptor1)ELISAKit人CXC趨化因子受體1
細胞色素P450亞酶CYP3A1(BROD)活性熒光定量檢測試劑盒20次
RatFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
BACE1重組人 BACE1 / ASP2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
角蛋白2(KRT2)重組蛋白 Recombinant Keratin 2 (KRT2)
GAL重組人 Galanin / GAL 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CHL1 Protein Human 重組人 CHL-1 蛋白
HA Protein H5N8 重組甲型流感 H5N8 (A/turkey/Ireland/1378/1983) 血凝素 (Hemagglutinin) 蛋白 His 標簽)
角蛋白2(KRT2)重組蛋白 Recombinant Keratin 2 (KRT2)
CHL1 Protein Human 重組人 CHL-1 蛋白
BACE1重組人 BACE1 / ASP2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
HA Protein H5N8 重組甲型流感 H5N8 (A/turkey/Ireland/1378/1983) 血凝素 (Hemagglutinin) 蛋白 His 標簽)
GAL重組人 Galanin / GAL 蛋白 (Fc 標簽) Protein
小鼠糖化白蛋白(GA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat cyclic adenosine monophosphate (cAMP) ELISA Kit 大鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)檢測試劑盒
Humahymus-leukemiaaigen,TLaELISAKit 人白血病抗原(TLa)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChikenPullorumDiseaes,PD檢測試劑盒雞白痢抗體檢測(PD)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒-LEPTIN10/20次
Mouseeosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit小鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
人臍帶血單核細胞小鼠髓過氧化物酶(MPO)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠水通道蛋白5(AQP-5)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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