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產(chǎn)品名稱:人軟骨細(xì)胞
產(chǎn)品特點:人軟骨細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元 HA Others H5N2 甲型流感 H5N2 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2 CoLo 320DM細(xì)胞,結(jié)腸癌細(xì)胞 人卵巢癌細(xì)胞系,3AO細(xì)胞
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-12-12
訪問次數(shù):30
人軟骨細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡介:
人軟骨分離自軟骨組織;軟骨組織由軟骨細(xì)胞、基質(zhì)及纖維構(gòu)成。軟骨組織再生能力強,這些增生的幼稚細(xì)胞形似纖維母細(xì)胞,以后逐漸變?yōu)檐浌悄讣?xì)胞,并形成軟骨基質(zhì),細(xì)胞被埋在軟骨陷窩內(nèi)而變?yōu)殪o止的軟骨細(xì)胞。根據(jù)軟骨組織內(nèi)所含纖維成分的不同,可將軟骨分為透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種,其中以透明軟骨的分布較廣,結(jié)構(gòu)也較典型。軟骨細(xì)胞(chondrocyte)位于軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層,單個分布,體積較小,呈橢圓形,長軸與軟骨表面平行,越向深層的軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形,細(xì)胞核圓形或卵圓形,染色淺,細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的軟骨細(xì)胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi),這些軟骨細(xì)胞由同一個母細(xì)胞分裂增殖而成,稱為同源細(xì)胞群。電鏡下,軟骨細(xì)胞有突起和皺褶,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
產(chǎn)品名稱 | 人軟骨細(xì)胞 | 組織來源 | 軟骨組織 |
英文名稱 | Human Chondrocyte Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
公司實驗室分離的人軟骨采用膠原酶-聯(lián)合消化制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2~3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠天冬酸基轉(zhuǎn)移酶試劑盒 小鼠天冬酸基轉(zhuǎn)移酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠天冬酸基轉(zhuǎn)移酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠天冬酸基轉(zhuǎn)移酶試劑盒、小鼠天冬酸基轉(zhuǎn)移酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白試劑盒 小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白試劑盒、小鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)試劑盒 小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)試劑盒、小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶試劑盒 小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶試劑盒、小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠鐵調(diào)素(Hepcidin)試劑盒 96T/48T
Rat melanocyte aibody (MC Ab) ELISA Kit 大鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)試劑盒
HumanglycolipidaoaibodyELISAKit 人抗糖脂抗體(glycolipid)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickeoxoplasmacirculatingaigen,TCA試劑盒雞弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞RHO蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MousefactorB,BFELISAKit小鼠B因子(BF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
LGMN重組小鼠 Legumain/ LGMN 蛋白 Protein
CK18(Cytokeratin 18 0.5mgCK18(Cytokeratin 18) 細(xì)胞角蛋白18(多肽)
PARP3重組人 PARP-3 / PARP3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CFL2 Protein Human 重組人 CFL2 / cofilin 2 / ADF 蛋白
VSIG4 Protein Mouse 重組小鼠 VSIG4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
CK18(Cytokeratin 18 0.5mgCK18(Cytokeratin 18) 細(xì)胞角蛋白18(多肽)
CFL2 Protein Human 重組人 CFL2 / cofilin 2 / ADF 蛋白
LGMN重組小鼠 Legumain/ LGMN 蛋白 Protein
VSIG4 Protein Mouse 重組小鼠 VSIG4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
PARP3重組人 PARP-3 / PARP3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
人軟骨細(xì)胞大鼠糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體(GI)試劑盒 ,英文名: GI ELISA Kit
Niu Shousu (LEP) ELISA Kit 牛瘦素(LEP)試劑盒
RatDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISAKit 大鼠脫輕表雄酮硫酸酯(DHEA-S)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHMGB-1ELISAKit大鼠高遷移率族蛋白B1
細(xì)胞PKCι激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitE-Cad大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白
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