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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：人輸尿管上皮細胞

英文名稱：Human Ureteral Epithelial Cells

組織來源：尿道組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

人輸尿管上皮分離自輸尿管組織；輸尿管上接腎盂，下連膀胱，是一對細長的管道，呈扁圓柱狀，位于腹膜后，為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu)，沿腰大肌內(nèi)側(cè)的前方垂直下降進入骨盆。輸尿管有三個狹窄部：一個在腎盂與輸尿管移行處（輸尿管起始處）；一個在越過小骨盆入口處；后一個在進入膀胱壁的內(nèi)部。這些狹窄是結(jié)石、及壞死組織容易停留的部位。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結(jié)構(gòu)，即瓦耳代爾鞘，它能有效地防止膀胱內(nèi)尿液返流到輸尿管。臨床上將輸尿管分為上、中、下三段，也可稱為腹段、盆段、膀胱段。其中，腹段自腎盂輸尿管交界處，到跨越髂動脈處；盆段，自髂動脈到膀胱壁；膀胱段，自膀胱壁內(nèi)斜行至膀胱粘膜、輸尿管開口。輸尿管管壁分為4層，黏膜層、固有層、肌層、外膜。黏膜層表面為移行上皮，約有4-5層細胞；固有層由細密的結(jié)締組織構(gòu)成，內(nèi)含膠原纖維和少量彈性纖維；輸尿管肌層主要由內(nèi)縱和外環(huán)兩層平滑肌組成；外膜為疏松結(jié)締組織，營養(yǎng)血管由外膜進入輸尿管。其中，輸尿管上皮細胞主要分布于黏膜層。

公司實驗室分離的人輸尿管上皮采用先消化、然后機械分離法使輸尿管分層、后膠原酶消化，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的人輸尿管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

小鼠酸性成纖維生長因子(mouse a-FGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠堿性成纖維生長因子(mouse b-FGF/FGF-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠Fibronectin（mouse Fibronectin）   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠Flt3(mouse Flt3)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat activin A (Activin-A) ELISA Kit 大鼠活化素A(Activin-A)試劑盒

Humangeneralanscriptioncomplex,GTCELISAKit 人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Deererythrocytemembraneprotein,EMP試劑盒紅細胞膜蛋白(EMP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞脘蛋白(PRION)蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 Protein

降鈣素(CT)重組蛋白 Recombinant Calcitonin (CT)

CKM重組人 CKM / CK-MM 蛋白 Protein

CHST15 Protein Human 重組人 CHST15 / GALNAC4S-6ST / BRAG 蛋白

MET Protein Canine 重組狗 c-MET / HGFR 蛋白

降鈣素(CT)重組蛋白 Recombinant Calcitonin (CT)

CHST15 Protein Human 重組人 CHST15 / GALNAC4S-6ST / BRAG 蛋白

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 Protein

MET Protein Canine 重組狗 c-MET / HGFR 蛋白

CKM重組人 CKM / CK-MM 蛋白 Protein

人輸尿管上皮細胞大鼠生長調(diào)節(jié)致癌基因γ(GROγ)試劑盒 ，英文名： GROγ ELISA Kit

Mouse vitamin E (VE) ELISA Kit 小鼠(VE)試劑盒

RatHistamine,HISELISAKit 大鼠組胺(HIS)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHDELISAKit大鼠組織蛋白去乙酰化酶

細胞VEGFR1(FLT-1)激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitα-BGTα-銀環(huán)蛇毒素

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用