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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：人胎盤絨毛膜細胞

英文名稱：Human Placental Amniotic Cells

組織來源：胎盤組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

人胎盤絨毛膜分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成。胚泡植入子宮內(nèi)膜后，在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起，以細胞滋養(yǎng)層為中軸，外裹合體滋養(yǎng)層，稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸，使初級干絨毛變成了次級干絨毛。當絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織，并與胚體內(nèi)的血管相通時，次級干絨毛改稱三級干絨毛。三級干絨毛末端的細胞滋養(yǎng)層細胞形成細胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育，叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤，而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。

公司實驗室分離的人胎盤絨毛膜采用-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的人胎盤絨毛膜經(jīng)hCG免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

人抑制素(INH)ELISA 試劑盒

Human anscription factor aibody -1 (ATF-1) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)檢測試劑盒

Human8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit 人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanIerleukin12,IL-12/P70檢測試劑盒人白介素12(IL-12/P70)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織科薩基病毒B(CoxsackievirusB)定量PCR擴增檢測試劑盒20次

HumanInvolucrin,iNVELISAKit人套膜蛋白(iNV)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

G-250蛋白質(zhì)印跡膜快速染色試劑 2*100ml

TSFP1/SP1(transcription factor Sp1 0.5mgTSFP1/SP1(transcription factor Sp1) SP1轉(zhuǎn)錄生長因子抗原

MAPK8重組人 JNK1 / MAPK8 蛋白 (GST 標簽) Protein

ITIH3 Protein Human 重組人 ITIH3 蛋白 (Fc 標簽)

IL12B Protein Human 重組人 IL12B / P40 蛋白

TSFP1/SP1(transcription factor Sp1 0.5mgTSFP1/SP1(transcription factor Sp1) SP1轉(zhuǎn)錄生長因子抗原

ITIH3 Protein Human 重組人 ITIH3 蛋白 (Fc 標簽)

G-250蛋白質(zhì)印跡膜快速染色試劑 2*100ml

IL12B Protein Human 重組人 IL12B / P40 蛋白

MAPK8重組人 JNK1 / MAPK8 蛋白 (GST 標簽) Protein

豚鼠白介素17(IL-17)檢測試劑盒 ，英文名： IL-17 ELISA Kit

Human arylsulfatase A (ASA) ELISA Kit 人芳基酯酶A(ASA)檢測試劑盒

rabbitLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit 兔子白三烯B4(LTB4)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta2-MGβ2-微球蛋白

細菌乙酰甲基原醇V-P檢測試劑盒20次

rabbitFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

人胎盤絨毛膜細胞人載脂蛋白E(ApoE)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human ApoE (Apolipoprotein E) ELISA Kit

人載脂蛋白F(ApoF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human ApoF (Apolipoprotein F) ELISA Kit

人載脂蛋白H(ApoH)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human ApoH (Apolipoprotein H) ELISA Kit

人載脂蛋白M(ApoM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human ApoM (Apolipoprotein M) ELISA Kit

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用