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產(chǎn)品名稱(chēng):人外周血單個(gè)核細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):人外周血單個(gè)核細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品NLGN1 Others Human 人 NLGN1 / Neuroligin-1 人細(xì)胞裂解液 NRG1 Others Canine 狗 NRG1-alpha (EGF Domain) 人細(xì)胞裂解液 TF Others Human 人 ansferrin / TF 人細(xì)胞裂解液
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-12
訪問(wèn)次數(shù):28
人外周血單個(gè)核細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人外周血單個(gè)核分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱(chēng)為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類(lèi)開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)即外周血中具有單個(gè)核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。目前,主要的分離方法是密度梯度離心法,因?yàn)檠褐懈饔行纬煞值谋戎卮嬖诓町?,因此得以分離出不同的細(xì)胞。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人外周血單個(gè)核細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 外周血 |
英文名稱(chēng) | Human Peripheral Blood Mononuclear Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血單個(gè)核采用取外周血、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血單個(gè)核經(jīng)過(guò)檢測(cè),且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 半貼半懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠免疫細(xì)胞表面抗原分子CD8+ 英文名稱(chēng): Mouse Cluster of Differeiation 8+ 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): CD8+
小鼠免疫細(xì)胞表面抗原分子8 英文名稱(chēng): Mouse Cluster Of Differeiation 8 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): CD8+
小鼠1型膠原 英文名稱(chēng): Mouse Collagen Type 1 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): C1
小鼠3型膠原 英文名稱(chēng): Mouse Collagen Type 3 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): C3
小鼠去甲(NE)試劑盒 96T/48T
Human urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 人型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒
Humanmammaliaargetofrapamyein,mTORELISAKit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4試劑盒豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞可溶性總蛋白制備試劑盒20次
MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
CD200重組食蟹猴 CD200 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a 0.5mgMAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓鞘相關(guān)糖蛋白(抗原)
FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標(biāo)簽) Protein
CRIP2 Protein Human 重組人 CRIP2 蛋白
CAMK4 Protein Mouse 重組小鼠 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a 0.5mgMAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓鞘相關(guān)糖蛋白(抗原)
CRIP2 Protein Human 重組人 CRIP2 蛋白
CD200重組食蟹猴 CD200 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CAMK4 Protein Mouse 重組小鼠 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標(biāo)簽) Protein
人外周血單個(gè)核細(xì)胞大鼠神經(jīng)元衍生孤兒受體1(NOR1)試劑盒 ,英文名: NOR1 ELISA Kit
Mouse surface membrane immunoglobulin (SmIg) ELISA Kit 小鼠細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)試劑盒
Ratacetylcholine,ACHELISAKit 大鼠乙酰(Ach)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHBsAb(Humanai-hepatitisBvirussurfaceaibody)ELISAKit人抗乙型肝病毒表面抗體
細(xì)胞艾滋病毒1蛋白酶(HIV-1PROTEASE)活性熒光淬滅法定量試劑盒20次
SheepIerleukin1β,IL-1βELISAKit綿羊白介素1β(IL-1β)試劑盒規(guī)格:96T/48T
如果你對(duì)人外周血單個(gè)核細(xì)胞感興趣,想了解更詳細(xì)的產(chǎn)品信息,填寫(xiě)下表直接與廠家聯(lián)系: |