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產(chǎn)品名稱(chēng):兔肺大靜脈平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):兔肺大靜脈平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品S-180(小鼠肉瘤細(xì)胞) 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2 細(xì)胞,HeLa 229細(xì)胞 EAC-E2G8細(xì)胞,鼠腹水瘤 人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHPASMC miRNA5 μg A9細(xì)胞,小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 HCC1428(人癌細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-12
訪問(wèn)次數(shù):28
兔肺大靜脈平滑肌細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔肺大靜脈平滑肌分離自肺大靜脈組織;肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動(dòng)物中,把動(dòng)脈血由肺送回心臟的靜脈,是一個(gè)靜脈里流動(dòng)脈血的血管。左右1對(duì),共4條,兩條連接右肺,兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接,而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動(dòng)脈高壓,是由于肺靜脈內(nèi)血液淤滯而引起的肺動(dòng)脈高壓。正常情況下,肺循環(huán)具有血壓低、阻力小和順應(yīng)性大的特點(diǎn),肺動(dòng)脈壓力高低取決于單位時(shí)間內(nèi)肺動(dòng)脈血流量和肺血管的阻力,要維持肺循環(huán)的低壓、低阻的狀態(tài),必須保證整個(gè)肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無(wú)阻,血液順利地由肺動(dòng)脈經(jīng)毛細(xì)血管進(jìn)入肺靜脈,再入左心室,經(jīng)過(guò)左心室收縮進(jìn)入體循環(huán),才能避免肺動(dòng)脈內(nèi)壓力升高。肺大靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。該細(xì)胞參與血管壁炎癥反應(yīng),保持靜脈管腔的通暢,還是多數(shù)動(dòng)脈疾病的靶細(xì)胞。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 兔肺大靜脈平滑肌細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 肺靜脈 |
英文名稱(chēng) | Rabbit Pulmonary Great Vein Smooth Muscle Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺大靜脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺大靜脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔肺大靜脈平滑肌體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶(hù)自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠胰島素樣蛋白3(INSL3)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: INSL3 ELISA Kit
Mouse urokinase type plasminogen activator (uPA) ELISA Kit 小鼠型纖溶酶原激活物(uPA)檢測(cè)試劑盒
Mouseansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit 小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanCoisolELISAKit人
細(xì)胞BMK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitBMP-7大鼠骨成型蛋白7
EGF重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
70kDa熱休克蛋白1樣蛋白(HSPA1L)重組蛋白 Recombinant Heat Shock 70kDa Protein 1 Like Protein (HSPA1L)
MKI67重組人 MKI67 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白
ACE2 Protein Rat 重組大鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白
防御素β113(DEFβ113)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 113 (DEFb113)
CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白
SEMA5A重組小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 Protein
FCGRT & B2M Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白
TSPAN8重組人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠鼠痘病毒(MPV)檢測(cè)試劑盒 96T/48T
Human gliadin IgA (Gliadin-IgA) ELISA Kit 人麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)檢測(cè)試劑盒
HumangelsonELISAKit 人凝膠原蛋白(gelson)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Duckviruseeritis,DEV檢測(cè)試劑盒鴨病毒性腸病毒(DEV)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
增強(qiáng)型DAB顯色溶液A液:10毫升B液:90毫升C液:1毫升
MousecyclophilinA,CyPAELISAKit小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔肺大靜脈平滑肌細(xì)胞小鼠神經(jīng)降壓肽()檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠神經(jīng)B(NKB)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠神經(jīng)A(NKA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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