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產(chǎn)品名稱:兔骨髓樹突狀細(xì)胞 (未成熟DC細(xì)胞)
產(chǎn)品特點:兔骨髓樹突狀細(xì)胞 (未成熟DC細(xì)胞)公司正在出售的產(chǎn)品SOST Others Rat 大鼠 SOST / Sclerostin 人細(xì)胞裂解液 滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基SM-prf IL18R1 Others Human 人 IL18R1 / CD218a 人細(xì)胞裂解液 RSPO2 Protein Human 重組人 FTLS / RSPO2
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-12-13
訪問次數(shù):25
兔骨髓樹突狀細(xì)胞 (未成熟DC細(xì)胞)的詳細(xì)資料:
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡介:
兔骨髓樹突狀分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細(xì)胞是由骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的;樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未成熟樹突狀細(xì)胞,典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞,貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成,多數(shù)呈懸浮生長, 細(xì)胞呈圓形,細(xì)胞體積進(jìn)一步增大,表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞。未成熟DC細(xì)胞長時間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細(xì)胞尚無特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志,主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進(jìn)行鑒定。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進(jìn)而激活T淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié);未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答,不能激活T細(xì)胞的信號,可導(dǎo)致T細(xì)胞無能,從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細(xì)胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低,一般在30%以下。
產(chǎn)品名稱 | 兔骨髓樹突狀細(xì)胞 (未成熟DC細(xì)胞) | 組織來源 | 骨髓 |
英文名稱 | Rabbit Bone Marrow Immature Dendritic Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
實驗室分離的兔骨髓未成熟DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔骨髓樹突狀(未成熟DC細(xì)胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細(xì)胞形態(tài)等綜合鑒定,純度可達(dá)80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài):圓形、梭形、多角形,形態(tài)多樣
傳代特性:屬于高度分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔骨髓樹突狀(未成熟DC細(xì)胞)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA 試劑盒
Human vacuolating cytotoxin associated protein A (VacA) ELISA Kit 人空泡毒素相關(guān)蛋白A(VacA)檢測試劑盒
Humanα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit 人α2抗纖溶酶(α2-AP)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor(Mouseovariancancermarker-CA125)ELISAKit小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125
飲料乙比色法定量檢測試劑盒20次
MouseIerleukin9,IL-9ELISAKit小鼠白介素9(IL-9)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
SPINT2重組小鼠 HAI-2 / SPINT2 蛋白 Protein
CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7 0.5mgCHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7) 型乙酰受體α7(多肽)
RAC2重組人 RAC2 蛋白 Protein
IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白
ACVR2B Protein Mouse 重組小鼠 ACVR2B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7 0.5mgCHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7) 型乙酰受體α7(多肽)
IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白
SPINT2重組小鼠 HAI-2 / SPINT2 蛋白 Protein
ACVR2B Protein Mouse 重組小鼠 ACVR2B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
RAC2重組人 RAC2 蛋白 Protein
豚鼠端粒酶(TE)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human cytokeratin 19 (CK-19) ELISA Kit 人細(xì)胞角蛋白19(CK-19)檢測試劑盒
HumanSS-B/LaAibody,ELISAKit 人抗SS-B/La抗體檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCyclin-D1檢測試劑盒人細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織FGR激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanpreptinELISAKit人preptin檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔骨髓樹突狀細(xì)胞 (未成熟DC細(xì)胞)人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類檢測試劑盒 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類試劑盒、人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類 檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類檢測試劑盒 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類試劑盒、人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類 檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
人軸突生長誘向因子4檢測試劑盒 人軸突生長誘向因子4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人軸突生長誘向因子4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人軸突生長誘向因子4試劑盒、人軸突生長誘向因子4 檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
人軸突生長誘向因子1檢測試劑盒 人軸突生長誘向因子1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人軸突生長誘向因子1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人軸突生長誘向因子1試劑盒、人軸突生長誘向因子1 檢測試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
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