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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔晶狀體上皮細胞

英文名稱：Rabbit Lens Epithelial Cells

組織來源：晶狀體組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

兔晶狀體上皮分離自晶狀體組織；晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層，僅含有上皮細胞及其產(chǎn)物，晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細胞分開；因而，晶狀體上皮細胞培養(yǎng)既無神經(jīng)和血管組織的干擾，又不受其它類型細胞如成纖維細胞的污染，保證了培養(yǎng)中細胞成分的單一性。晶狀體上皮細胞主要負責調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡，包括電解質(zhì)和液體的輸送。在正常的發(fā)育過程中，晶狀體上皮細胞分化和成熟，然后遷移到晶狀體內(nèi)部，產(chǎn)生晶體蛋白，自身也拉長而變成晶狀體纖維細胞，并終失去細胞核和其它的細胞器。研究表明，晶狀體上皮細胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調(diào)控，包括表皮生長因子和胰島素等。細胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形，呈單層生長、連成膜狀。晶狀體上皮細胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細胞，其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關(guān)，體外培養(yǎng)是研究其生長規(guī)律的主要手段。

公司實驗室分離的兔晶狀體上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的兔晶狀體上皮經(jīng)BFSP2（晶狀體蛋白）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)試劑盒   96T/48T

小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒   96T/48T

小鼠β甘露糖苷酶(βManase)試劑盒   96T/48T

小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)試劑盒   96T/48T

小鼠黑色素細胞抗體(MC Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat thioredoxin reductase (xR) ELISA Kit 大鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)試劑盒

humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 人谷脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-neuophilgranulesaibody,ANGA試劑盒人抗中性粒細胞顆?？贵w(ANGA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量試劑盒20次

HumanUlaSensitiveProstateSpecificAigen,PSAUSELISAKit人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)試劑盒規(guī)格：96T/48T

BACE1重組小鼠 BACE-1 蛋白 Protein

Clenbuterol Hydrochloride/BSA 鹽酸克偶聯(lián)牛血清白蛋白BSA 1mgClenbuterol Hydrochloride/BSA 鹽酸克偶聯(lián)牛血清白蛋白BSA

LSAMP重組人 LSAMP 蛋白 Protein

F3 Protein Human 重組人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白

CD38 Protein Mouse 重組小鼠 SCARB3 蛋白

Clenbuterol Hydrochloride/BSA 鹽酸克偶聯(lián)牛血清白蛋白BSA 1mgClenbuterol Hydrochloride/BSA 鹽酸克偶聯(lián)牛血清白蛋白BSA

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兔晶狀體上皮細胞大鼠酪酸3/色酸5單加氧酶激活蛋白ζ(YWHAζ)試劑盒 ，英文名： YWHAζ ELISA Kit

Mouse inducible niic oxide syhase (iNOS) ELISA Kit 小鼠誘導型合成酶(iNOS)試劑盒

RatParathyroidHormone-LikeRelatedProtein,PTHrPELISAKit 大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforF-TESTOELISAKit大鼠游離睪同

細胞黑色素(MELANIN)染色試劑盒50次

RatprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用