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產(chǎn)品名稱(chēng):兔胚成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):兔胚成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品Wistar大鼠脂肪間質(zhì)干細(xì)胞 Wistar rat adipose mesenchymal stem cells 小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 ERBB4 Others Rat
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-13
訪(fǎng)問(wèn)次數(shù):27
兔胚成纖維細(xì)胞的詳細(xì)資料:
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔胚成纖維分離自胚胎;成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細(xì)胞常用作ES細(xì)胞培養(yǎng)常用的飼養(yǎng)層細(xì)胞,能產(chǎn)生抑制ES細(xì)胞自主分化和促進(jìn)ES細(xì)胞增殖的因子,故能有效地促進(jìn)ES細(xì)胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性,且分泌效果優(yōu)于外源添加的一些因子,而且可以為ES細(xì)胞的培養(yǎng)提供類(lèi)似于體內(nèi)的微環(huán)境,故在研究哺乳動(dòng)物ES細(xì)胞中得到廣泛使用。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 兔胚成纖維細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 胚胎 |
英文名稱(chēng) | Rabbit Embryonic Fibroblast Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔胚成纖維采用消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔胚成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔胚成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠C-C趨化因子6(CCL6)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: CCL6 ELISA Kit
Mice testosterone (T) ELISA Kit 小鼠睪酮(T)檢測(cè)試劑盒
Mousemyeloperoxidase,MPOELISAKit 小鼠髓過(guò)氧化物酶(MPO)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanichinellaaibodyELISAKit人旋毛蟲(chóng)抗體
通用型小腸結(jié)腸耶爾森氏菌(Yersiniaeerocolitica)試劑盒20次
ELISAKitENA-78/CXCL5大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78
HSPD1重組小鼠 HSPD1 / HSP60 蛋白 Protein
ADM (Adrenomedullin 0.1mgADM (Adrenomedullin)(22-52) 腎上腺髓質(zhì)素(22-52)
MET重組人 c-MET / HGFR 蛋白 (aa 956-1390, His & GST 標(biāo)簽) Protein
IL13 Protein Human 重組人 IL13 / ALRH 蛋白
IL13RA2 Protein Rat 重組大鼠 IL13RA2 / IL13R 蛋白
叉頭框蛋白O1(FOXO1)重組蛋白 Recombinant Forkhead Box Protein O1 (FOXO1)
IL13 Protein Human 重組人 IL13 / ALRH 蛋白
TNFSF10重組小鼠 TNFSF10 / TRAIL / APO-2L 蛋白 (aa 118-291, His 標(biāo)簽) Protein
IL8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL-8 / CXCL8 蛋白
SIGIRR重組人 SIGIRR / TIR8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
豚鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: ECP ELISA Kit
Residual human bovine serum albumin detection 人的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)
MonkeyIerleukin-8,IL-8ELISAKit白介素8(IL-8/CXCL8)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBLC-1/CXCL13(HumanB-LymphocyteChemoatacta1,BLC-1)ELISAKit人B-淋巴細(xì)胞趨化因子
細(xì)菌離子(Na)濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
RabbitMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAKit兔子巨噬細(xì)胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔胚成纖維細(xì)胞神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素 3(-3) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素 4(-4) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
I 型膠原 N 末端肽 (X) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
(NO) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀(guān)察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶(hù)自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀(guān)察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪(fǎng)直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
如果你對(duì)兔胚成纖維細(xì)胞感興趣,想了解更詳細(xì)的產(chǎn)品信息,填寫(xiě)下表直接與廠(chǎng)家聯(lián)系: |