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產(chǎn)品名稱:兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞

產(chǎn)品特點:兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞公司正在出售的產(chǎn)品ZR-75-30(人癌細胞) 小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH2 Hela, 人細胞系 小鼠成纖維細胞,3T3TK細胞 SPA-A1(肺腺癌細胞) CST3 Others Mouse 小鼠 CST3 / Cystatin-C / Cystatin-3 人細胞裂解液

產(chǎn)品型號:

更新日期:2024-12-13

訪問次數(shù):32

兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞的詳細資料:

兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞

實驗報告:

兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細胞簡介:

兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞

兔胚胎肢芽間充質(zhì)干分離自胚胎肢芽;胚胎肢芽存在于兩棲類以上的大多數(shù)脊椎動物胚胎中,在四肢發(fā)生的初期階段,在身體兩側(cè)有呈芽狀的突起,內(nèi)部是中胚層側(cè)板的體壁板垱厚形成,表面有表皮覆蓋。在這個中胚層區(qū)肢芽迅速伸長,不久,在其前端即見有指的突起。在此時期間,其內(nèi)部的中胚層分化成軟骨、肌肉等。這些分化組織,在將肢芽作分離培養(yǎng)的時候也可以獲得。根據(jù)對兩棲類的有尾類的研究,作為肢原基各部的胚發(fā)能力,肢芽物質(zhì)的大部分是位于背半部,而前半部主要參與基部形成,后半部參與前端的形成。在實驗上,即使將肢的原基分成二半,每一半調(diào)整好都可形成基本上近于正常形態(tài)的肢體,而且肢體各軸的極性和側(cè)性也逐漸決定。間充質(zhì)干細胞(MSC)是屬于中胚層的一類多能干細胞,主要存在于結(jié)締組織和器官間質(zhì)中,是具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞;這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數(shù)量,并在特定條件下轉(zhuǎn)變成為一種或多種構(gòu)成機體組織或器官的細胞,從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。

產(chǎn)品名稱

兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞

組織來源

胚胎

英文名稱

Rabbit Embryonic   Limb Bud Mesenchymal Stem Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡介:

兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞

實驗室分離的兔胚胎肢芽間充質(zhì)干采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔胚胎肢芽間充質(zhì)干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):成纖維細胞樣

傳代特性:可傳3-5代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

兔胚胎肢芽間充質(zhì)干體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。


兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞

注意事項:

兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:
兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞

小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA 試劑盒

Kappa aibodies to human immunoglobulin light chain (-IgLC) ELISA Kit 輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)檢測試劑盒

HumanleucocyteaigenB27,HLA-B27ELISAKit 人類白細胞抗原B27(HLA-B27)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRP檢測試劑盒魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

真菌/酵母蛋白巰基/結(jié)合巰基含量比色法定量檢測試劑盒20

MouseComplemefragme3a,C3aELISAKit小鼠補體片斷3a(C3a)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein

Insulin protein (from porcine pancreas 0.5mgInsulin protein (from porcine pancreas) 豬胰島素

TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

IL18 Protein Human 重組人 IL18 / Interleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白

Insulin protein (from porcine pancreas 0.5mgInsulin protein (from porcine pancreas) 豬胰島素

IL18 Protein Human 重組人 IL18 / Interleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein

IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白

TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cytotoxic T lymphocyte associated aigen 4 (CTLA-4/CD152) ELISA kit E 人細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)檢測試劑盒E

Humanai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit 人抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumancaneousTcell-atactingchemokine,CTACK檢測試劑盒人皮膚T細胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織EPHB4激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

HumanProgesterone,PROGELISAKit人孕激素/孕同(PROG)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液   Vascular permeability test solion

姬姆薩染液   Peroxidase staining

巴氏染液(脫落細胞染色)   Name

快速HE組織細胞及脫落細胞染液   Phosphate buffer


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