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產(chǎn)品名稱:兔脾淋巴細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):兔脾淋巴細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品表達(dá)SV40T和EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293ET 人腎上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 FCER2 Others Human 人 CD23 / FCER2 人細(xì)胞裂解液 CD1D Others Human 人 CD1D / R3G1 人細(xì)胞裂解液 恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-12-13
訪問次數(shù):23
兔脾淋巴細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡介:
兔脾淋巴分離自脾臟組織;脾臟是機(jī)體大的免疫器官,占全身淋巴組織總量的25%,含有大量的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,是機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的中心。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處,與9-11肋相對,長軸與第10肋一致。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰,前方有胃,后方與左腎、左腎上腺毗鄰,下端與結(jié)腸脾溝相鄰,地柔軟的網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞器官。淋巴細(xì)胞(lymphocyte)白細(xì)胞的一種,由淋巴器官產(chǎn)生,機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分。淋巴器官根據(jù)其發(fā)生和功能的差異,可分為中樞淋巴器官(又名初級淋巴器官)和周圍淋巴器官(又名次級淋巴器官)兩類。前者包括、腔上囊或其相當(dāng)器官(有人認(rèn)為在哺乳動(dòng)物是骨髓)。它們無須抗原刺激即可不斷增殖淋巴細(xì)胞,成熟后將其轉(zhuǎn)送至周圍淋巴器官。后者包括脾、淋巴結(jié)等。成熟淋巴細(xì)胞需依賴抗原刺激而分化增殖,繼而發(fā)揮其免疫功能。
產(chǎn)品名稱 | 兔脾淋巴細(xì)胞 | 組織來源 | 脾臟 |
英文名稱 | Rabbit Spleen Lymphocyte Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔脾淋巴采用機(jī)械研磨法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為1×106cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的兔脾淋巴經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài):圓形
傳代特性:不增殖;不傳代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔脾淋巴體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔乙酰(ACh)試劑盒 96T/48T
兔合成酶(NOS)試劑盒 96T/48T
兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)試劑盒 96T/48T
兔血小板衍生生長因子(PDGF)試劑盒 96T/48T
小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human vitamin D receptor (VD R) ELISA Kit 人受體(VD R)試劑盒
Humanai-zonapellucidaaibody,aZPELISAKit 人抗透明帶抗體(aZP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancholesterol,CH試劑盒人(CH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
紫外線處理DNA損傷彗星熒光試劑盒20次
HumansecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit人分泌型0脂酶A2(sPLA2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
CD1D重組小鼠 CD1D / R3G1 蛋白 Protein
Caspase-1 (ICE; CASP-1;P45 0.5mgCaspase-1 (ICE; CASP-1;P45) 天冬-胱特異性蛋白酶家族(抗原)
ENO2重組人 NSE / ENO2 / Enolase 2 蛋白 Protein
GSTM2 Protein Human 重組人 GSTM2 / GST4 蛋白
GFRA1 Protein Rat 重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Caspase-1 (ICE; CASP-1;P45 0.5mgCaspase-1 (ICE; CASP-1;P45) 天冬-胱特異性蛋白酶家族(抗原)
GSTM2 Protein Human 重組人 GSTM2 / GST4 蛋白
CD1D重組小鼠 CD1D / R3G1 蛋白 Protein
GFRA1 Protein Rat 重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ENO2重組人 NSE / ENO2 / Enolase 2 蛋白 Protein
兔脾淋巴細(xì)胞大鼠顆粒酶A(GZMA)試劑盒 ,英文名: GZMA ELISA Kit
Mouse apolipoprotein H (Apo-H) ELISA Kit 小鼠載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒
RatPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforFSH促卵泡生成素
細(xì)胞環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1/2)總活性熒光定量試劑盒20次
RatplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)試劑盒規(guī)格:96T/48T
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