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產(chǎn)品中心Products 當(dāng)前位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 原代細(xì)胞 > 兔原代細(xì)胞 > 產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品名稱:兔氣管平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品特點(diǎn):兔氣管平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品大鼠癌細(xì)胞;SHZ-88 肝癌細(xì)胞,BEL-7405細(xì)胞 MEF細(xì)胞,早代小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞) MDA-MB-231, 人癌細(xì)胞 骨髓瘤,P3-X63-Ag8細(xì)胞 SW 1271 [SW-1271; SW1271](人肺腺癌細(xì)胞)

產(chǎn)品型號(hào):

更新日期:2024-12-13

訪問(wèn)次數(shù):21

兔氣管平滑肌細(xì)胞的詳細(xì)資料:

兔氣管平滑肌細(xì)胞

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

兔氣管平滑肌細(xì)胞
一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔氣管平滑肌細(xì)胞

兔氣管平滑肌分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來(lái),環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。氣管平滑肌是氣管的重要結(jié)構(gòu)組成之一,在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用;能夠保持氣道張力,維持氣道管狀形態(tài),從而有利于氣體流通,保持肺部通氣。氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。氣管平滑肌細(xì)胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,其增生、肥大是氣道重塑的關(guān)鍵。

產(chǎn)品名稱

兔氣管平滑肌細(xì)胞

組織來(lái)源

氣管

英文名稱

Rabbit Tracheal   Smooth Muscle Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡(jiǎn)介:

兔氣管平滑肌細(xì)胞

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔氣管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔氣管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

兔氣管平滑肌細(xì)胞

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%


兔氣管平滑肌細(xì)胞

注意事項(xiàng):

兔氣管平滑肌細(xì)胞
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:
兔氣管平滑肌細(xì)胞

生長(zhǎng)分化因子-3   英文名稱:   growth differeiation factor 3   規(guī)格:      英文縮寫:   GDF-3

膠質(zhì)纖維酸性蛋白   英文名稱:   glial fibrillary acidic protein   規(guī)格:      英文縮寫:   GFAP

生長(zhǎng)激素釋放多肽Ghrelin   英文名稱:   peptide hormone Ghrelin   規(guī)格:      英文縮寫:   Ghrelin

胰高血糖素   英文名稱:   Glucagon   規(guī)格:      英文縮寫:   GC

豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat signal ansduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit 大鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)試劑盒

HumancytosolicphospholipaseA2,cPLA2ELISAKit 人胞漿型0脂酶A2(cPLA2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancrystalproteinsβ,Cryβ試劑盒人晶體蛋白β(Cryβ)試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定性試劑盒20

HumanProstaglandinDSyhase,PGDSELISAKit人前列腺素D合成酶(PGDS)試劑盒規(guī)格:96T/48T

HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

PACAP(6-38 Peptide 0.5mgPACAP(6-38 Peptide) 腺苷酸環(huán)化酶激活肽6-38

LILRB3重組人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 Protein

IL12A & IL27B Protein Human 重組人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白

ACE2 Protein Human 重組人 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

PACAP(6-38 Peptide 0.5mgPACAP(6-38 Peptide) 腺苷酸環(huán)化酶激活肽6-38

IL12A & IL27B Protein Human 重組人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白

HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

ACE2 Protein Human 重組人 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

LILRB3重組人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 Protein

兔氣管平滑肌細(xì)胞大鼠抗存活素抗體(Ai-Surv)試劑盒 ,英文名: Ai-Surv ELISA Kit

Monkey adrenomedullin (ADM) ELISA Kit腎上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒

RatCompleme4,C4ELISAKit 大鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFree-T3(HumanFreei-iodothyronineIndes)ELISAKit人游離三甲狀腺原

細(xì)胞活化10(FACTORXa)活性熒光定量試劑盒20

Ratpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)試劑盒規(guī)格:96T/48T


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