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產(chǎn)品名稱:兔腎足突細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):兔腎足突細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品二氫還原酶缺陷型中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr- 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-p7 表皮癌細(xì)胞,A-431細(xì)胞 H22-H8D8細(xì)胞,鼠肝癌細(xì)胞 ADK Others Human 人 ADK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-13
訪問次數(shù):28
兔腎足突細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔腎足突分離自腎組織;腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動(dòng)脈進(jìn)入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動(dòng)脈。在腎小球內(nèi),微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進(jìn)行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。足細(xì)胞(podocyte)即腎小囊臟層上皮細(xì)胞,它附著于腎小球基底膜(GBM)的外側(cè),連同GBM和毛細(xì)血管內(nèi)皮一起構(gòu)成了腎小球血液濾過屏障。足細(xì)胞特殊的解剖位置,使得其體內(nèi)研究較為困難;又由于正常成年機(jī)體的腎臟足細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞,體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞不能增殖。足細(xì)胞呈星型多突狀,胞體較大,由胞體伸出許多突起,又稱足突(FP),呈指狀交叉復(fù)蓋于GBM外表面,并通過黏附分子和蛋白多糖分子與GBM相連。足細(xì)胞在正常情況下可以分泌GBM的主要組成成分,IV型膠原和纖維連接蛋白(FN);在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解GBM作用的基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)和組織蛋白酶,從而在GBM的代謝平衡中發(fā)揮重要作用。足細(xì)胞之間鄰近的足突相互交替,形成了許多30-40nm的裂孔,孔上覆蓋一層厚4-6nm的裂孔隔膜,即腎小球足突間裂孔隔膜。后者是血漿蛋白通過脈管系統(tǒng)的后屏障,對(duì)于維持腎小球?yàn)V過屏障結(jié)構(gòu)與功能完整性發(fā)揮關(guān)鍵作用。
產(chǎn)品名稱 | 兔腎足突細(xì)胞 | 組織來源 | 腎 |
英文名稱 | Rabbit Optic Papilla Astrocyte Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腎足突采用機(jī)械研磨過不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩結(jié)合膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腎足突經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔腎足突體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠單酰脫羧酶(MLYCD)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: MLYCD ELISA Kit
Mouse alpha N has amido glucosidase (alpha NAG) ELISA Kit 小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)檢測(cè)試劑盒
ELISA 小鼠血管內(nèi)皮抑素(mouse Endostatin) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforKLK10(HumanKallikrein10)ELISAKit人10
通用型大腸桿菌(E.Coli)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitTBA大鼠總膽汁酸
IL6ST重組小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
白介素23(IL23)重組蛋白 Recombinant Interleukin 23 (IL23)
SRFBP1重組人 SRFBP1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
HSF1 Protein Human 重組人 HSF1 / HSTF1 蛋白
CD160 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD160 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
白介素23(IL23)重組蛋白 Recombinant Interleukin 23 (IL23)
HSF1 Protein Human 重組人 HSF1 / HSTF1 蛋白
IL6ST重組小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
CD160 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD160 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SRFBP1重組人 SRFBP1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠C型尿肽(CNP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat vitamin D2 (VD2) ELISA Kit 大鼠2(VD2)檢測(cè)試劑盒
HumanInhibin,INH-AELISAKit 人抑制素A(INH-A)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancoloncancer-specificaigen-3,CCSA-3檢測(cè)試劑盒人大腸癌專一抗原3(CCSA-3)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織ATP生物發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒50次
Humanpyruvatedehydrogenase-E1,PDHE1ELISAKit人同酸脫氫酶E1(PDHE1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔腎足突細(xì)胞兔肌鈣蛋白Ⅰ檢測(cè)試劑盒 兔肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒、兔肌鈣蛋白Ⅰ 檢測(cè)試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔環(huán)0酸腺苷檢測(cè)試劑盒 兔環(huán)0酸腺苷試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔環(huán)0酸腺苷試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔環(huán)0酸腺苷試劑盒、兔環(huán)0酸腺苷檢測(cè)試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔核因子κB受體活化因子配基檢測(cè)試劑盒 兔核因子κB受體活化因子配基試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔核因子κB受體活化因子配基試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔核因子κB受體活化因子配基試劑盒、兔核因子κB受體活化因子配基檢測(cè)試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ檢測(cè)試劑盒 兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ試劑盒、兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ 檢測(cè)試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
如果你對(duì)兔腎足突細(xì)胞感興趣,想了解更詳細(xì)的產(chǎn)品信息,填寫下表直接與廠家聯(lián)系: |