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細胞簡介：

兔視網(wǎng)膜Muller分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。層叫雙節(jié)細胞，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細胞層，專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力強。視網(wǎng)膜Muller細胞作為視網(wǎng)膜中的主要膠質(zhì)細胞，大約占視網(wǎng)膜膠質(zhì)細胞的90%，因而在視網(wǎng)膜疾病中起著何種作用也受到越來越多的關(guān)注。在超微結(jié)構(gòu)水平上，Muller細胞的胞質(zhì)似乎比臨近的其他細胞更高的電子密度，更發(fā)達的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，細胞核是典型的卵圓形或多角形。但在不同物種中或同一物種中的不同部位，Muller細胞形態(tài)也會有所差異的。視網(wǎng)膜Muller細胞是一種特化的神經(jīng)膠質(zhì)細胞，不僅具有維持視網(wǎng)膜的正常結(jié)構(gòu)和功能的作用，并調(diào)制視網(wǎng)膜神經(jīng)元活動，還能參與多種病理過程，尤其是眼底增殖性病變，如增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變、增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變等，體外培養(yǎng)Muller細胞是研究這些增殖性病變途徑之一。

方法簡介：

實驗室分離的兔視網(wǎng)膜Muller采用膠原酶消化法和反復(fù)消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔視網(wǎng)膜Muller經(jīng)GS免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：梭形、多角形

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔視網(wǎng)膜Muller體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

兔子促甲狀腺素(TSH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子雌二醇(E2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子表皮生長因子(EGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat neuroophin 4 (-4) ELISA Kit 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)試劑盒

HumanOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit 人骨保護素配體(OPGL)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancaspaseactivateddeoxyribonuclease,CAD試劑盒人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因油菜(canola)GT73品系試劑盒20次

humansimilaoRIKENcDNA4931408D14geneELISAKit人類似RIKENcDNA4931408D14基因試劑盒規(guī)格：96T/48T

ACVR1重組大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (Fc 標簽) Protein

FAM3B/PANDER(PANcreatic DERived factor 0.5mgFAM3B/PANDER(PANcreatic DERived factor) 一種新型的胰島細胞因子(抗原)

GAD1重組人 GAD67 / GAD1 蛋白 Protein

GNGT1 Protein Human 重組人 GNGT1 / GNG1 蛋白

CNDP2 Protein Mouse 重組小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 蛋白

FAM3B/PANDER(PANcreatic DERived factor 0.5mgFAM3B/PANDER(PANcreatic DERived factor) 一種新型的胰島細胞因子(抗原)

GNGT1 Protein Human 重組人 GNGT1 / GNG1 蛋白

ACVR1重組大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CNDP2 Protein Mouse 重組小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 蛋白

GAD1重組人 GAD67 / GAD1 蛋白 Protein

兔視網(wǎng)膜Muller細胞大鼠交聯(lián)物(PY)試劑盒 ，英文名： PY ELISA Kit

Mouse beta hexosaminidase A (beta -hexosaminidase A) ELISA Kit 小鼠β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)試劑盒

ELISA 小鼠堿性成纖維生長因子(mouse b-FGF/FGF-2)  進口分裝

CLIAKitforKAF/ARELISAKit大鼠角化細胞內(nèi)分泌因子/雙調(diào)蛋白

通用型蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量試劑盒20次

ELISAKitMBP大鼠主要堿性蛋白

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。