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產(chǎn)品名稱:兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)

產(chǎn)品特點:兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)公司正在出售的產(chǎn)品家兔骨髓間充質(zhì)干細胞;2012083MSC EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞(彝族);HYL APOL1 Others Human 人 APOL1 / apolipoprotein L1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 RGMA Others Human 人 RGMA 人細胞裂解液

產(chǎn)品型號:

更新日期:2024-12-13

訪問次數(shù):30

兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)的詳細資料:

細胞簡介:

兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)

兔外周血DC分離自外周血,由外周血單核細胞誘導(dǎo)而成的;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞,典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長,在GM-CSFIL4的作用下形成葡萄串樣集落,細胞大而形態(tài)不規(guī)則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內(nèi)細胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細胞,貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成,多數(shù)呈懸浮生長, 細胞呈圓形,細胞體積進一步增大,表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標(biāo)志,主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細胞表面標(biāo)志、在混合淋巴細胞反應(yīng)中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進而激活T淋巴細胞,誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié);未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答,不能激活T細胞的信號,可導(dǎo)致T細胞無能,從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低,一般在30%以下。

產(chǎn)品名稱

兔外周血樹突狀細胞   (未成熟DC細胞)

組織來源

外周血

英文名稱

Rabbit Peripheral   Blood Immature Dendritic Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡介:

兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)

實驗室分離的兔外周血未成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導(dǎo)而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔外周血樹突狀(未成熟DC細胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細胞形態(tài)等綜合鑒定,純度可達80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:半貼壁半懸浮

細胞形態(tài):圓形、梭形、多角形,形態(tài)多樣

傳代特性:屬于高度分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO25%

兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)


實驗報告:

兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)

大鼠跨膜蛋白27(TMEM27)檢測試劑盒 ,英文名: TMEM27 ELISA Kit

Monkey macrophage inflammatory protein 1 alpha (MIP-1 alpha /CCL3) ELISA Kit巨噬細胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)檢測試劑盒

Ratdopamine,DAELISAKit 大鼠多巴胺(DA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFT4游離T4

細胞花生四烯酸(arachidonicacid)酶反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20

Ratplatelet-derivedgrowthfactor-BB,PDGF-BBELISAKit大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

CEACAM1重組小鼠 CEACAM1 / CD66a 蛋白 Protein

B7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1 0.5mgB7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1) 程序性死亡配體1(多肽)

CSF1R重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (aa 543-922, His & GST 標(biāo)簽) Protein

IGFBP6 Protein Human 重組人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白

F3 Protein Rat 重組大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白

B7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1 0.5mgB7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1) 程序性死亡配體1(多肽)

IGFBP6 Protein Human 重組人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白

CEACAM1重組小鼠 CEACAM1 / CD66a 蛋白 Protein

F3 Protein Rat 重組大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白

CSF1R重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (aa 543-922, His & GST 標(biāo)簽) Protein

豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human aconitase 2 (ACO-2) ELISA Kit 人烏頭酸酶2(ACO-2)檢測試劑盒

HumanNoradrenalineBitaas,NE-BELISAKit 人重去甲(NE-B)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumancrosslinkedN-telopeptideoftypecollagen,X檢測試劑盒人Ⅰ型膠原N末端肽(X)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒20

HumanProstaglandinF2α,PGF2αELISAKit人前列腺素F2α(PGF2α)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)四甲基化銨   100g

TMA   500g

四甲基胺   5g

TMB   1g

注意事項:

兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。


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