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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔終板軟骨細胞

英文名稱：Rabbit Endplate Chondrocyte Cells

組織來源：椎間盤

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

兔終板軟骨分離自椎間盤終板軟骨組織；椎體終板是椎體在生長發(fā)育過程中，椎體上下面的骨骺板骨化停止后形成骨板，呈輕度凹陷，即為骨性終板。椎體終板的中央仍為一薄層透明軟骨覆蓋，并終生存在，即為軟骨終板，上下軟骨終板與髓核和纖維環(huán)連接共同構(gòu)成椎間盤。椎體終板構(gòu)成了椎間盤的上下邊界，位于椎體中心的松質(zhì)骨和椎間盤之間。是由軟骨下骨和厚度相當?shù)母采w其上的軟骨組成。主要作用是防止椎間盤髓核組織嵌入椎體，同時具有平衡分散應力的作用。成熟的終板軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi)，這些終板軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，終板軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，終板軟骨細胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的終板軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

實驗室分離的兔終板軟骨采用膠原酶-聯(lián)合消化并結(jié)合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔終板軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每3-4天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：梭形、多角形

傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔終板軟骨體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠17-酮類固醇(17-KS)檢測試劑盒 ，英文名： 17-KS ELISA Kit

Mouse thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)檢測試劑盒

MousecrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISAKit 小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanpreptinELISAKit人preptin

通用型豬圓環(huán)病毒(CIRCOVIRUS)試劑盒20次

ELISAKitET-1大鼠內(nèi)皮素1

CCL17重組食蟹猴 CCL17 / TARC 蛋白 Protein

Metal ion transporter 擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運蛋白(抗原 0.5mgMetal ion transporter 擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運蛋白(抗原)

PDE9A重組人 PDE9A 蛋白 Protein

COMMD9 Protein Human 重組人 COMMD9 蛋白

TIGIT Protein Mouse 重組小鼠 TIGIT / VSTM3 蛋白 (Fc 標簽)

Metal ion transporter 擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運蛋白(抗原 0.5mgMetal ion transporter 擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運蛋白(抗原)

COMMD9 Protein Human 重組人 COMMD9 蛋白

CCL17重組食蟹猴 CCL17 / TARC 蛋白 Protein

TIGIT Protein Mouse 重組小鼠 TIGIT / VSTM3 蛋白 (Fc 標簽)

PDE9A重組人 PDE9A 蛋白 Protein

小鼠三0酸腺苷(ATP)檢測試劑盒 96T/48T

Human endocrine gland vascular endothelial growth factor (EG-VEGF) ELISA Kit 人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)檢測試劑盒

Humanbeta2glycoprotein,β2-GPELISAKit 人β2糖蛋白(β2-GP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

GuineaPig50%complemehemolysis,CH50檢測試劑盒豚鼠血清總補體(CH50)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性比色法定量檢測試劑盒20次

MouseClaracellprotein,CC16ELISAKit小鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔終板軟骨細胞小鼠Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠Ⅱ(FⅡ)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠受體()檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠抗復合物(TAT)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用