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細胞簡介：

小鼠骨髓基質分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質細胞是一類具有多向分化潛能的干細胞，其中部分細胞有自我復制、高度增殖和多向分化能力，在特定培養(yǎng)條件下可向骨、軟骨、神經(jīng)膠質細胞、心肌、骨胳肌、脂肪細胞、血管內(nèi)皮細胞等間葉組織細胞轉化。骨髓基質細胞在自然條件下主要分化為成骨細胞，在不同的培養(yǎng)條件下其分化途徑不同，其在成骨細胞與成脂細胞分化之間呈反向變化。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠骨髓基質采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠骨髓基質經(jīng)CD29、CD44免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠Bcl-2樣蛋白1(Bcl2-L-1/Bcl-X)檢測試劑盒 ，英文名： Bcl2-L-1/Bcl-X ELISA Kit

Mouse bone morphogenetic protein 4 (BMP-4) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)檢測試劑盒

MouseFolicacid,FAELISAKit 小鼠(FA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumahyroglobulin,TGELISAKit人甲狀腺球蛋白

通用型亞鹽熒光定量檢測試劑盒20次

ELISAKitPAPP-A大鼠相關血漿蛋白A

CX3CL1重組食蟹猴 / 恒河猴 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IAA/BSA 吲哚-3-乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白 5mgIAA/BSA 吲哚-3-乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白

CD160重組人 CD160 蛋白 Protein

GMFB Protein Human 重組人 GMFB 蛋白

TNFRSF4 Protein Mouse 重組小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (Fc 標簽)

IAA/BSA 吲哚-3-乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白 5mgIAA/BSA 吲哚-3-乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白

GMFB Protein Human 重組人 GMFB 蛋白

CX3CL1重組食蟹猴 / 恒河猴 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

TNFRSF4 Protein Mouse 重組小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (Fc 標簽)

CD160重組人 CD160 蛋白 Protein

小鼠白介素16(IL-16)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat epithelial neuophil activating peptide 78 (ENA-78/CXCL5) ELISA Kit 大鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)檢測試劑盒

Humandeoxypyridinoline,DPDELISAKit 人脫氧酚/脫氧啉(DPD)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancailageoligomericprotein,COMP檢測試劑盒人軟骨寡聚蛋白(COMP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉基因棉花MON1445品系試劑盒20次

HumansmoothmuscleMyosin,SMMELISAKit人平滑肌肌球蛋白(SMM)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠骨髓基質細胞兔子肝細胞生長因子檢測試劑盒   兔子肝細胞生長因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子肝細胞生長因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子肝細胞生長因子試劑盒、兔子肝細胞生長因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

兔血纖蛋白原檢測試劑盒   兔血纖蛋白原試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔血纖蛋白原試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔血纖蛋白原試劑盒、兔血纖蛋白原檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

兔血栓素B2檢測試劑盒   兔血栓素B2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔血栓素B2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔血栓素B2試劑盒、兔血栓素B2 檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

兔血清淀粉樣蛋白A檢測試劑盒   兔血清淀粉樣蛋白A試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔血清淀粉樣蛋白A試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔血清淀粉樣蛋白A試劑盒、兔血清淀粉樣蛋白A 檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。