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產(chǎn)品名稱:小鼠冠狀動脈成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品特點:小鼠冠狀動脈成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品人小腦顆粒細(xì)胞裂解物HCGCL CM-M037小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7 人類氣管上皮細(xì)胞(HTEpC) 500,000cells 人腦血管平滑肌細(xì)胞HBVSMC 人小氣管上皮細(xì)胞
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-12-16
訪問次數(shù):27
小鼠冠狀動脈成纖維細(xì)胞的詳細(xì)資料:
細(xì)胞簡介:
小鼠冠狀動脈成纖維分離自冠狀動脈組織;冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,起于主動脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動脈的分布分為三型:右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的對分支。左冠狀動脈為一短干,發(fā)自左主動脈竇,經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構(gòu)成冠狀動脈壁的主要細(xì)胞成分,細(xì)胞膜上分布著多種離子通道,如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道;它們參與了靜息電位的維持與細(xì)胞膜電位的復(fù)極化、超極化,調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能,此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細(xì)胞增殖、炎癥及凋亡等。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠冠狀動脈成纖維細(xì)胞 | 組織來源 | 冠狀動脈 |
英文名稱 | Mouse Coronary Artery Fibroblast Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
實驗室分離的小鼠冠狀動脈成纖維采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的小鼠冠狀動脈成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠冠狀動脈成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠三葉因子1(TFF1)檢測試劑盒 ,英文名: TFF1 ELISA Kit
Mouse sex hormone binding globulin (SHBG) ELISA Kit 小鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)檢測試劑盒
RatEndotheliallipase,ELELISAKit 大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHA(MouseHyaluronicacid)ELISAKit小鼠透明質(zhì)酸
細(xì)胞半胱蛋白酶-8(CASPASE-8)活性熒光定量檢測試劑盒20次
RatVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
SELE重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
環(huán)氧化合物水解酶4(EPHX4)重組蛋白 Recombinant Epoxide Hydrolase 4 (EPHX4)
EDEM2重組人 EDEM2 / C20orf31 蛋白 Protein
CSNK2A1 Protein Human 重組人 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
IL11RA Protein Canine 重組狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白
環(huán)氧化合物水解酶4(EPHX4)重組蛋白 Recombinant Epoxide Hydrolase 4 (EPHX4)
CSNK2A1 Protein Human 重組人 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
SELE重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
IL11RA Protein Canine 重組狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白
EDEM2重組人 EDEM2 / C20orf31 蛋白 Protein
小鼠尿微量白蛋白(ALB)檢測試劑盒 96T/48T
Rat parathyroid hormone related protein (PTHrP) ELISA Kit 大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)檢測試劑盒
Humandynorphin,DynELISAKit 人強啡肽(Dyn)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Human25-DihydroxyvitaminD3,HVD3檢測試劑盒人25羥基3(25(OH)D3/25HVD3)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母纖維素酶(cellulase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
MouseApolipoproteinE,Apo-EELISAKit小鼠載脂蛋白E(Apo-E)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠冠狀動脈成纖維細(xì)胞小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠活化蛋白C(APC)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠(ypsin)ELISAKit ELISA. 96T/48T
注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
如果你對小鼠冠狀動脈成纖維細(xì)胞感興趣,想了解更詳細(xì)的產(chǎn)品信息,填寫下表直接與廠家聯(lián)系: |