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產(chǎn)品名稱:小鼠呼吸道上皮細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):小鼠呼吸道上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品人小細(xì)胞肺癌;NCI-H2227 人紅系白血病細(xì)胞;TF-1 小鼠腦瘤細(xì)胞;BC3H1 MCF 7B(人癌細(xì)胞) BHK(幼倉鼠腎細(xì)胞) 人羊膜細(xì)胞;WISH F2 Others Mouse 小鼠 FII / F2 / Thrombin 人細(xì)胞裂解液
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-16
訪問次數(shù):28
小鼠呼吸道上皮細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠呼吸道上皮分離自呼吸道;呼吸道是肺呼吸時(shí)氣流所經(jīng)過的通道,有肺脊椎動(dòng)物的呼吸道分上、下兩部:鼻、咽和喉合稱上呼吸道。氣管及其以后一分再分的管道,合稱為下呼吸道,或稱為氣管樹。氣管樹是隨著動(dòng)物的進(jìn)化逐漸復(fù)雜化的。整個(gè)呼吸道內(nèi)表面都分布有分泌液和纖毛(鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外),它能溫暖(或冷卻)、濕潤和凈化吸入的空氣,對(duì)于呼吸器官和機(jī)體有著保護(hù)作用。呼吸道以骨或軟骨做支架,其內(nèi)表面覆蓋著黏膜,黏膜內(nèi)分布著豐富的毛細(xì)血管。呼吸道上皮細(xì)胞屬于假復(fù)層纖毛柱狀上皮,分布于呼吸道的內(nèi)表面,主要由柱狀,杯形,梭形和錐形等不同形狀細(xì)胞組成。看上去像復(fù)層上皮,但實(shí)際上所有細(xì)胞底部均附于基膜上,屬單層上皮,故稱假復(fù)層柱狀上皮,上皮表面有纖毛,杯狀細(xì)胞可分泌粘液,包裹著大量細(xì)菌,借助纖毛不斷擺動(dòng)將其慢慢移動(dòng)至出消化道。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠呼吸道上皮細(xì)胞 | 組織來源 | 呼吸道 |
英文名稱 | Mouse Respiratory Epithelial Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠呼吸道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠呼吸道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠I型膠原(COL1)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: COL1 ELISA Kit
Mouse secretory immunoglobulin A (sIgA) ELISA Kit 小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)檢測(cè)試劑盒
ELISA 小鼠血小板生成素(mouse TPO) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforICAM-3/CD50ELISAKit大鼠細(xì)胞間粘附分子3
通用型嗜肺軍團(tuán)菌(Legionellapneumophilia)試劑盒20次
ELISAKitPLGF大鼠胎盤生長(zhǎng)因子
SELP重組小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 Protein
紅細(xì)胞補(bǔ)體受體1(CR1)重組蛋白 Recombinant Complement Receptor 1, Erythrocyte (CR1)
TSPAN7重組人 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白 Protein
CSNK2A2 Protein Human 重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
IL17A Protein Marmoset 重組絨猴 IL17 / IL17A 蛋白
紅細(xì)胞補(bǔ)體受體1(CR1)重組蛋白 Recombinant Complement Receptor 1, Erythrocyte (CR1)
CSNK2A2 Protein Human 重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
SELP重組小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 Protein
IL17A Protein Marmoset 重組絨猴 IL17 / IL17A 蛋白
TSPAN7重組人 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白 Protein
小鼠型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)檢測(cè)試劑盒
Humanasialoglycoproteieceptor,ASGPRELISAKit 人去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Human28SribosomeRNPaibody,28SrRNP檢測(cè)試劑盒人28S抗核糖體抗體(28SrRNP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母腺苷酸激酶(Adenylatekinase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Mouseai-zonapellucidaaibody,aZPELISAKit小鼠抗透明帶抗體(aZP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠呼吸道上皮細(xì)胞小鼠可溶性 P- 選擇素 (mouse sP-Selectin/ sCD62P) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 -β1 (mouse TGF-β1) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子 -1(mouse TIMP-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
小鼠壞死因子 - a (mouse TNF- a ) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 法國 Diaclone
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