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產(chǎn)品名稱:小鼠氣管上皮細胞
產(chǎn)品特點:小鼠氣管上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品人真皮淋巴內(nèi)皮細胞總RNAHDLEC NA 大鼠小腸隱窩上皮細胞;IEC-6 巨核細胞白血病細胞,Dami細胞 NR8383細胞,人T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細胞;Jurkat D,E 人骨骼肌細胞 (HSkMC)mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-12-17
訪問次數(shù):13
小鼠氣管上皮細胞的詳細資料:
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介:
小鼠氣管上皮分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細胞,還作為效應(yīng)細胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng)。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上存在很大的相似性,因此,在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠氣管上皮細胞 | 組織來源 | 氣管 |
英文名稱 | Mouse Tracheal Epithelial Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠氣管上皮采用-混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠氣管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 英文名稱: Angiotensin Conveing Enzyme 規(guī)格: 英文縮寫: ACE
膜聯(lián)蛋白2 英文名稱: Annexin 2 規(guī)格: 英文縮寫: ANXA-2
骨堿性0酸酶 英文名稱: bone alkaline phosphatase 規(guī)格: 英文縮寫: BALP
凋亡因子BAX 英文名稱: apoptogen BAX 規(guī)格: 英文縮寫: BAX
小鼠抑制素A(INH-A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human granulysin (granulysin) ELISA Kit 人顆粒溶素(granulysin)試劑盒
HumanGasinELISAKit 人胃泌素(Gasin)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor6-K-PGELISAKit大鼠6同前列腺素
飲料D-蘋果酸比色法定量試劑盒20次
MousemammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit小鼠癌標志物-CA153試劑盒規(guī)格:96T/48T
CPM重組小鼠 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白 Protein
β-血小板球蛋白(βTG)重組蛋白 Recombinant Beta-Thromboglobulin (bTG)
PRTFDC1重組人 PRTFDC1 蛋白 Protein
CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白
CD63 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白
肝脂酶(LIPC)重組蛋白 Recombinant Lipase, Hepatic (LIPC)
CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白
BGN重組小鼠 Biglycan / PG-S1 / BGN 蛋白 (Fc 標簽) Protein
THPO Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白
PDHA1重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白1 (aa 30-390) Protein
小鼠氣管上皮細胞大鼠復(fù)制蛋白A 70kDaDNA結(jié)合亞基(RPA1)試劑盒 ,英文名: RPA1 ELISA Kit
Porcine methemoglobin (MHB) ELISA Kit 豬高鐵血紅蛋白(MHB)試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMBP(Mousemyelinbasicprotein)ELISAKit小鼠髓0脂堿性蛋白
體液氧化型(GSSG)濃度比色法定量試劑盒50次
ELISAKitLp-PL-A2脂蛋脂酶A2
如果你對小鼠氣管上皮細胞感興趣,想了解更詳細的產(chǎn)品信息,填寫下表直接與廠家聯(lián)系: |