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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：小鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細胞

英文名稱：Mouse Placental Chorionic Trophoblast Cells

組織來源：胎盤組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

小鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當?shù)莫毩⑿浴ＬケP還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成。胚泡植入子宮內(nèi)膜后，在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起，以細胞滋養(yǎng)層為中軸，外裹合體滋養(yǎng)層，稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸，使初級干絨毛變成了次級干絨毛。當絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織，并與胚體內(nèi)的血管相通時，次級干絨毛改稱三級干絨毛。三級干絨毛末端的細胞滋養(yǎng)層細胞形成細胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育，叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤，而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。

公司實驗室分離的小鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層采用-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的小鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層經(jīng)Cytokeratin-7免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)檢測試劑盒 ，英文名： α-SMA ELISA Kit

Mouse oxytocin (OT) ELISA Kit 小鼠催產(chǎn)素(OT)檢測試劑盒

ELISA 小鼠血小板源生長因子-BB(mouse PDGF-BB)  進口分裝

CLIAKitforIgMELISAKit大鼠免疫球蛋白M

通用型牛布氏桿菌(Brucellaabous)試劑盒20次

大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4ELISAKit大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4ELISAKit，大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4ELISAKit，

ICOS重組大鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標簽) Protein

ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1 0.5mgED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚層發(fā)育不良抗原

HDAC3重組人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

DCX Protein Human 重組人 DCX 蛋白 (aa 45-150, GST 標簽)

JAM3 Protein Mouse 重組小鼠 JAM3 / JAM-C 蛋白

ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1 0.5mgED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚層發(fā)育不良抗原

DCX Protein Human 重組人 DCX 蛋白 (aa 45-150, GST 標簽)

ICOS重組大鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標簽) Protein

JAM3 Protein Mouse 重組小鼠 JAM3 / JAM-C 蛋白

HDAC3重組人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

小鼠可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human hydroxyproline (Hyp) ELISA Kit 人羥脯(Hyp)檢測試劑盒

Humanai-thymocyteglobulin,ATGELISAKit 人抗細胞球蛋白(ATG)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAgrin檢測試劑盒人聚集蛋白(Agrin)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NAT)活性比色法定量檢測試劑盒20次

MouseADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細胞小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-1(mouse MMP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-2(mouse MMP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-3(mouse MMP-3)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-9(mouse MMP-9)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用