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細胞簡介：

小鼠胰島β分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰島β細胞，即胰島B細胞，是胰島細胞的一種，屬內分泌細胞的一種，能分泌胰島素，與胰島α細胞分泌的胰高血糖素一起起到調節(jié)血糖的作用。胰島B細胞功能受損、胰島素分泌絕對或相對不足（胰島素抵抗），會使血糖升高，從而引發(fā)糖尿病。而胰島B細胞癌變會生成胰島素瘤，引起惡性血糖降低癥狀。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠胰島β采用先用膠原酶消化分離得到胰島、再用逐級消化胰島制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠胰島β經(jīng)Insulin含量檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠天冬酸轉酶(AST)檢測試劑盒 ，英文名： AST ELISA Kit

Mouse myelin basic protein (MBP) ELISA Kit 小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒

Rati-iodothyronine,T3ELISAKit 大鼠三甲狀腺原(T3)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHO-1ELISAKit大鼠血紅素氧合酶1

細胞PKCγ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKi-proBNP大鼠N端前腦素

CD99L2重組小鼠 CD99L2 / MIC2L1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter 0.5mgBad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter) 相關死亡促進因子Bad抗原

SELM重組人 SELM / Selenoprotein M 蛋白 Protein

DUSP3 Protein Human 重組人 DUSP3 / VHR 蛋白 (His & GST 標簽)

TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 標簽)

Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter 0.5mgBad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter) 相關死亡促進因子Bad抗原

DUSP3 Protein Human 重組人 DUSP3 / VHR 蛋白 (His & GST 標簽)

CD99L2重組小鼠 CD99L2 / MIC2L1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 標簽)

SELM重組人 SELM / Selenoprotein M 蛋白 Protein

小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA 試劑盒 96T/48T

Ai endothelial cell aibodies (AECA) in rat ELISA Kit 大鼠抗內皮細胞抗體(AECA)檢測試劑盒

HumanflagellinELISAKit 人鞭毛蛋白(flagellin)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAngiotensinⅡReceptor2,AT2R檢測試劑盒人血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物甘油-3-0酸脫氫酶(Glycerol-3-PhosphateDehydrogenase)總活性比色法定量檢測試劑盒20次

Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠胰島β細胞小鼠巰基轉移酶（GST）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠過氧化酶（GSH-Px）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠(GSH)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。