產(chǎn)品名稱:大鼠脊髓神經(jīng)干細胞
產(chǎn)品特點:大鼠脊髓神經(jīng)干細胞公司正在出售的產(chǎn)品CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 標簽) Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256 膠質(zhì)瘤細胞,U251細胞 WEHI 231細胞,小鼠B淋巴細胞 人胚肺成纖維細胞;IMR-90 B16細胞,黑色素瘤細胞
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-12-10
訪問次數(shù):28
大鼠脊髓神經(jīng)干細胞的詳細資料:
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介:
大鼠脊髓神經(jīng)干分離自脊髓組織;脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護;是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū),主要由神經(jīng)細胞構(gòu)成;在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),主要由有髓神經(jīng)纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié),31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞,它可以通過不對等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細胞。需要強調(diào)的是,在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中,不同的神經(jīng)干細胞類型產(chǎn)生的子代細胞種類不同,分布也不同。神經(jīng)干細胞作為干細胞的一種,它具有其它所有干細胞的基本特征:具有自我維持和自我更新能力,具有多種分化潛能,具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細胞的能力,這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生,對損傷和疾病具有反應(yīng)能力。神經(jīng)干細胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移,并向神經(jīng)細胞、星形膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞分化的能力,已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復和再生研究的熱點,體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細胞培養(yǎng)模型是其基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用的前提。神經(jīng)干細胞在培養(yǎng)3-4d后,可形成神經(jīng)球,神經(jīng)球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠脊髓神經(jīng)干細胞 | 組織來源 | 脊髓組織 |
英文名稱 | Rat Spinal Cord Neural Stem Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠脊髓神經(jīng)干采用消化后差速貼壁,結(jié)合神經(jīng)干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠脊髓神經(jīng)干經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 球形
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%,Accutase
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)檢測試劑盒 ,英文名: FASL ELISA Kit
Porcine orexin receptor (OXR) ELISA Kit 豬食欲素受體(OXR)檢測試劑盒
大豆特定基因序列(Lectin)核酸檢測試劑盒 48T
CLIAKitforLTB(Humanheat-labileeerotoxinBsubunit)ELISAKit人不耐熱腸毒素B亞單位
添加劑同酸比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitIgG雞免疫球蛋白G
CD302重組大鼠 CD302 / CLEC13A 蛋白 (Fc 標簽) Protein
Eukaryotic aspartyl protease(Rice 0.5mgEukaryotic aspartyl protease(Rice) 天冬蛋白酶家族蛋白(水稻蛋白的一種)(抗原)
FLT1重組人 VEGFR1 / FLT-1 蛋白 Protein
CCL24 Protein Human 重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白
CA9 Protein Mouse 重組小鼠 Carbonic Anhydrase IX / Car9 蛋白
Eukaryotic aspartyl protease(Rice 0.5mgEukaryotic aspartyl protease(Rice) 天冬蛋白酶家族蛋白(水稻蛋白的一種)(抗原)
CCL24 Protein Human 重組人 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白
CD302重組大鼠 CD302 / CLEC13A 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CA9 Protein Mouse 重組小鼠 Carbonic Anhydrase IX / Car9 蛋白
FLT1重組人 VEGFR1 / FLT-1 蛋白 Protein
小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human Coxsackie virus IgG (Cox V-IgG) ELISA Kit 人柯薩奇病毒IgG(Cox V-IgG)檢測試劑盒
Humaacrolimus-FK506ELISAKit 人(FK506)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor8-epi-PGF2Alpha(Human8-epi-prostaglandinF2alpha0ELISAKit人8-異構(gòu)前列腺素F2α
異檸檬酸待測樣品處理試劑盒20次
MouseMethylaseELISAKit小鼠甲基化酶(Methylase)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠脊髓神經(jīng)干細胞血管內(nèi)皮生長因子受體2 英文名稱: Rat Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2 規(guī)格: 英文縮寫: VEGF-R2
大鼠氧化酶 英文名稱: Xahine oxidase 規(guī)格: 英文縮寫: XOD
小鼠肌動蛋白β 英文名稱: Mouse Actin β 規(guī)格: 英文縮寫: ACTβ
小鼠?;碳さ鞍?span> 英文名稱: Mouse Acylation Stimulating Protein 規(guī)格: 英文縮寫: ASP
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