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細胞簡介：

大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)分離自脊髓組織；脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu)，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護；是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對的神經(jīng)，分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個H形（蝴蝶型）灰質(zhì)區(qū)，主要由神經(jīng)細胞構(gòu)成；在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū)，主要由有髓神經(jīng)纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)（稱為脊神經(jīng)）分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應的31節(jié)，31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)膠質(zhì)細胞，簡稱膠質(zhì)細胞，是神經(jīng)組織中除神經(jīng)元以外的另一大類細胞，也有突起，但無樹突和軸突之分，廣泛分布于中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)。在哺乳類動物中，神經(jīng)膠質(zhì)細胞與神經(jīng)元的細胞數(shù)量比例約為10：1。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中的神經(jīng)膠質(zhì)細胞主要有星形膠質(zhì)細胞、少突膠質(zhì)細胞（與前者合稱為大膠質(zhì)細胞）和小膠質(zhì)細胞等。傳統(tǒng)認為膠質(zhì)細胞屬于結(jié)締組織，其作用僅是連接和支持各種神經(jīng)成分，其實神經(jīng)膠質(zhì)還起著分配營養(yǎng)物質(zhì)、參與修復和吞噬的作用，在形態(tài)、化學特征和胚胎起源上都不同于普通結(jié)締組織。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)采用膠原酶-聯(lián)合消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學試劑抑制法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)經(jīng)GC（Galactocerebroside）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 不增殖；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠凋亡誘導因子(AIF)檢測試劑盒 ，英文名： AIF ELISA Kit

Porcine orexin / orexin B (OX-B) ELISA Kit 豬食欲素/阿立新B(OX-B)檢測試劑盒

大豆特定基因序列(Lectin)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforLTB(HumanlymphotoxinBeta)ELISAKit人淋巴毒素β

體液組織蛋白酶L(CATHEPSINL)活性熒光定量檢測試劑盒20次

ELISAKitHSP-20雞熱休克蛋白20

GFRA1重組狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 Protein

NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C 0.5mgNR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C) 谷受體2C(多肽)

CA3重組人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 Protein

CCL27 Protein Human 重組人 CCL27 / CTACK 蛋白

GLIPR1 Protein Mouse 重組小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白

NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C 0.5mgNR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C) 谷受體2C(多肽)

CCL27 Protein Human 重組人 CCL27 / CTACK 蛋白

GFRA1重組狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 Protein

GLIPR1 Protein Mouse 重組小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白

CA3重組人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 Protein

小鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human Coxsackie virus IgM (Cox V-IgM) ELISA Kit 人柯薩奇病毒IgM(Cox V-IgM)檢測試劑盒

HumanHirudinELISAKit 人水蛭素(Hirudin)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor8-epi-PGF2Alpha(Rabbit8-epi-prostaglandinF2alpha)ELISAKit兔8-異構(gòu)前列腺素

銀染法細胞端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10次

MouseMethemoglobin,MHBELISAKit小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細胞血管內(nèi)皮生長因子受體 1(VEGF-R3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

sVE-Cadherin   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender

小鼠 ACTH(mouse ACTH)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 Phoenix

mouse Activin A   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。