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產(chǎn)品中心Products 當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 原代細(xì)胞 > 大鼠原代細(xì)胞 > 產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品名稱:大鼠精原干細(xì)胞

產(chǎn)品特點:大鼠精原干細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品CD86 Others Human 人 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 CC Others Human 人 CC / chymoypsin C 人細(xì)胞裂解液 FZD1 Others Mouse 小鼠 FZD1 人細(xì)胞裂解液 人胚胎氣管組織來源細(xì)胞

產(chǎn)品型號:

更新日期:2024-12-10

訪問次數(shù):21

大鼠精原干細(xì)胞的詳細(xì)資料:

細(xì)胞簡介:

大鼠精原干細(xì)胞

大鼠精原干分離自睪丸組織;精原干細(xì)胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內(nèi)的一群生精干細(xì)胞,是成體內(nèi)的定向干細(xì)胞。精原干細(xì)胞的一些優(yōu)勢使其成為動物轉(zhuǎn)基因的理想宿主細(xì)胞。精原干細(xì)胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項生命活動的調(diào)節(jié)機(jī)制的深入研究,精子發(fā)生機(jī)理的進(jìn)一步闡明以及精原干細(xì)胞轉(zhuǎn)染,異體、異種移植技術(shù)的實際應(yīng)用,都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化,以期得到較高產(chǎn)量和純度的有活力的精原細(xì)胞用于體外培養(yǎng)。在哺乳動睪丸內(nèi),精子發(fā)生時一個受高度調(diào)控和持續(xù)的過程,精原干細(xì)胞(SSCs)一方面進(jìn)行自我更新維持干細(xì)胞數(shù)量,另一方面又不斷執(zhí)行分化成各級生精細(xì)胞直至最后生成精子。精原干細(xì)胞定居在曲精細(xì)管上皮的基膜處,是哺乳動物精子發(fā)生的最原始細(xì)胞,也是動物體內(nèi)一起能將遺傳信息傳遞的干細(xì)胞。精原干細(xì)胞體外培養(yǎng)體系的建立,在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧業(yè)生產(chǎn)及制備轉(zhuǎn)基因動物等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。精原干細(xì)胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群細(xì)胞,具有自我更新能力和多向分化潛能,是哺乳動物體內(nèi)能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細(xì)胞。

產(chǎn)品名稱

大鼠精原干細(xì)胞

組織來源

睪丸組織

英文名稱

Rat Spermatogonial   Stem Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡介:

大鼠精原干細(xì)胞

公司實驗室分離的大鼠精原干采用先機(jī)械吹打、后消化,結(jié)合Percoll密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠精原干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

大鼠精原干細(xì)胞

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 懸浮

細(xì)胞形態(tài) 球形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠精原干細(xì)胞


實驗報告:

大鼠精原干細(xì)胞
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大鼠精原干細(xì)胞
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠精原干細(xì)胞

大鼠β2整合素(ITG β2/CD11+CD18)檢測試劑盒 ,英文名: ITG β2/CD11+CD18 ELISA Kit

Mouse growth hormone releasing hormone (GHRH) ELISA Kit 小鼠促生長激素釋放激素(GHRH)檢測試劑盒

ELISA 小鼠血小板活化因子(mouse PAF)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-1BetaELISAKit魚類白介素1β

通用型牛病毒性腹瀉病毒(BovineViralDiarrhoeaVirus;BVDV)定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20

ELISAKitVIP大鼠血管活性腸肽

SERPINB3C重組小鼠 Serpinb3c 蛋白 Protein

Bcl-xL(human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse 0.5mgBcl-xL(human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse) Bcl-xL蛋白抗原

CXCL12重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a, His 標(biāo)簽) Protein

FCGR1 Protein Human 重組人 CD64 / FCGR1A 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

ACVR1B Protein Rat 重組大鼠 ACVR1B / ALK-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

Bcl-xL(human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse 0.5mgBcl-xL(human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse) Bcl-xL蛋白抗原

FCGR1 Protein Human 重組人 CD64 / FCGR1A 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

SERPINB3C重組小鼠 Serpinb3c 蛋白 Protein

ACVR1B Protein Rat 重組大鼠 ACVR1B / ALK-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CXCL12重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a, His 標(biāo)簽) Protein

小鼠(GSH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human retinoic acid inducible gene /RIG-1 like receptor (RLR) ELISA Kit 人酸誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體(RLR)檢測試劑盒

HumanomeinELISAKit 人網(wǎng)膜素(omein)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-spermaibody,AsAb檢測試劑盒人抗抗體(AsAb)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物纖維二糖酶(cellobiase)活性比色法定量檢測試劑盒20

Humanoponi,Tn-TELISAKit人肌鈣蛋白T(Tn-T)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

大鼠精原干細(xì)胞小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠特異生長因子/相關(guān)因子(TSGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠羥脯酸(Hyp)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事項:

大鼠精原干細(xì)胞
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。



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