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產(chǎn)品名稱:大鼠食管上皮細胞
產(chǎn)品特點:大鼠食管上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品CSF2RA Others Human 人 GM-CSFR 人細胞裂解液 rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓 正常人細胞,Hs 181.Tes細胞 LLC-MK2(恒河猴腎細胞) CD40 Others Human 人 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-12-10
訪問次數(shù):38
大鼠食管上皮細胞的詳細資料:
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介:
大鼠食管上皮分離自食管組織;食管是咽和胃之間的消化管,食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短,隨著頸部的伸長和心肺的下降,而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中,食管的上皮細胞增殖,由單層變?yōu)閺?fù)層,食管使管腔變狹窄,甚至一度閉鎖,以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,黏膜層,包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮,耐摩擦,有保護作用。在食管與胃賁門交界處,復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復(fù)層扁平上皮細胞覆蓋,其頂端細胞膜和細胞間連接復(fù)合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障,防止食管內(nèi)容物的滲入。特別的是,層屏障使表層細胞的基質(zhì)外側(cè)細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學(xué)上講,食管上皮由兩層組成,基底層和分化層;其中,僅基底層的細胞可以增殖,然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標記的依序表達。食管上皮細胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠食管上皮細胞 | 組織來源 | 食管組織 |
英文名稱 | Rat Esophageal Epithelial Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠食管上皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠食管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human cytochrome C (Cyt-C) ELISA Kit 人(Cyt-C)試劑盒
Humanai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit 人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancyclooxygenase-2,COX-2試劑盒人環(huán)加氧酶2(COX-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織GSK3β激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanPolySeriumAigen,PHSAELISAKit人多聚血清蛋白(PHSA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
HA重組甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase 0.5mgS6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase) 6-0酸脫氫酶抗原
IL1RL1重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白 Protein
IMPA1 Protein Human 重組人 IMP1 / IMPA1 蛋白
IL25 Protein Human 重組人 IL25 蛋白 (Fc 標簽)
S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase 0.5mgS6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase) 6-0酸脫氫酶抗原
IMPA1 Protein Human 重組人 IMP1 / IMPA1 蛋白
HA重組甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
IL25 Protein Human 重組人 IL25 蛋白 (Fc 標簽)
IL1RL1重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白 Protein
大鼠食管上皮細胞人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA 試劑盒
Human tumor necrosis factor beta (TNF- beta) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子β(TNF-β)試劑盒
HumanMethylaseELISAKit 人甲基化酶(Methylase)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGH試劑盒人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)琥珀酰明膠法比色定量試劑盒20次
HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit人白血病抑制因子(LIF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
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