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產(chǎn)品名稱:大鼠小氣道平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):大鼠小氣道平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品EFNA1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標(biāo)簽) 293ET(人胚細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞)) 人胚胎肌肉組織來源細(xì)胞;CCC-HSM-2 BB7.2細(xì)胞, 分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞 大鼠肉瘤細(xì)胞,WK256細(xì)胞
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-11
訪問次數(shù):24
大鼠小氣道平滑肌細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠小氣道平滑肌分離自小氣道組織;臨床上通常將內(nèi)徑小于2mm的小細(xì)支氣管稱為小氣道。小氣道具有氣流阻力小,但易阻塞的特點(diǎn)。在平靜吸氣時(shí),空氣進(jìn)入狹窄的鼻咽部,產(chǎn)生渦流。由于小氣道已無軟骨支持,在脫離纖維鞘嵌入肺組織后,管腔通暢性不象軟骨性氣道,易于受胸腔的壓力變化的影響。小氣道上皮細(xì)胞形成連續(xù)呼吸道內(nèi)層,作為隔絕外界有害物質(zhì)的物理和功能屏障發(fā)揮著的作用。小氣道位于肺泡和氣管的交界處,這些細(xì)胞在功能上能夠調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、產(chǎn)生化學(xué)因子進(jìn)行宿主防御、表達(dá)粘附分子,并可能通過HLA-DR表達(dá)呈遞抗原;它們還能產(chǎn)生液體有助于肺液的平衡。許多呼吸道疾病,如哮喘、支氣管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化,都涉及呼吸道表面上皮細(xì)胞的破壞;小氣道上皮細(xì)胞的培養(yǎng)可為防止呼吸道擴(kuò)增疾病和重塑提供新的治療選擇。小氣道平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。小氣道的生理功能特點(diǎn):①小氣道阻力小;②氣流速度慢;③可調(diào)節(jié)控制通氣與血流比例。小氣管平滑肌細(xì)胞主要功能:①保持氣道張力維持小氣道形態(tài);②肺小氣道進(jìn)行氣體交換,病變可引起換氣功能障礙;③炎癥、痰液阻塞或當(dāng)氣道外壓大于氣道內(nèi)壓時(shí)容易造成小氣道閉合、萎陷。小氣管平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:①支氣管炎;②肺氣腫;③慢性阻塞性肺疾病。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠小氣道平滑肌細(xì)胞 | 組織來源 | 小氣道 |
英文名稱 | Rait Small Airway Smooth Muscle Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小氣道平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小氣道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠小氣道平滑肌體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠降解產(chǎn)物(FDP)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: FDP ELISA Kit
Pla zeatin riboside (ZR) ELISA Kit 植物玉米素核苷(ZR)檢測(cè)試劑盒
Mousemacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit 小鼠巨噬細(xì)胞性蛋白5(MIP-5)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit人晚期糖基化終末產(chǎn)物
細(xì)胞HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitC3a大鼠補(bǔ)體片斷3a
HA重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原 0.5mgPACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原)
MANF重組人 MANF / ARMET 蛋白 Protein
CD47 Protein Human 重組人 CD47 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ACVR1 Protein Human 重組人 ALK-2 / ACVR1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原 0.5mgPACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原)
CD47 Protein Human 重組人 CD47 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
ACVR1 Protein Human 重組人 ALK-2 / ACVR1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
MANF重組人 MANF / ARMET 蛋白 Protein
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat calmodulin (CAM) ELISA Kit 大鼠鈣調(diào)素(CAM)檢測(cè)試劑盒
Humanverylateappearingaigen,VLAELISAKit 人遲現(xiàn)抗原(VLA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
C3檢測(cè)試劑盒鮭魚補(bǔ)體蛋白3規(guī)格:96T/48T
魚類受精卵細(xì)胞凍存試劑盒(低溫)50次
MouseInsulin,INSELISAKit小鼠胰島素(INS)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠小氣道平滑肌細(xì)胞小鼠牙本質(zhì)涎0蛋白 英文名稱: Mouse Dein Sialophosphoprotein 規(guī)格: 英文縮寫: DSP
小鼠DNA抗體 英文名稱: Mouse Deoxyribonucleic Acid Aibody 規(guī)格: 英文縮寫: DNA.Ab
小鼠氧化酶 英文名稱: Mouse Diamine Oxidase 規(guī)格: 英文縮寫: DAO
小鼠多巴胺受體D1 英文名稱: Mouse Dopamine receptor D1 規(guī)格: 英文縮寫: DRD1
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